【摘 要】
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目的:为了加深对血脑屏障的认识与进一步对其研究,构建血脑屏障的体外模型.方法:原代分离培养SD大鼠乳鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascularendothelial cells, BMVEC),采
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目的:为了加深对血脑屏障的认识与进一步对其研究,构建血脑屏障的体外模型.方法:原代分离培养SD大鼠乳鼠脑微血管内皮细胞(brain microvascularendothelial cells, BMVEC),采用倒置显微镜观察细胞形态结构和生长规律,用免疫组化检测紧密连接蛋白claudin-5和ZO-1.内皮细胞与原代培养的星形胶质细胞在Transwell小室上建立BBB体外实验模型,用EVOM2观察跨膜电阻(Trans-epitheliumelectrical resistant,TEER)的动态变化,探讨血脑屏障模型建立以及特性.结果:BMVEC培养至融合以后具有典型的“铺路石”样外观,claudin-5与Z0-1免疫组化证实细胞间形成紧密连接,单独培养BMVEC的TEER值为(161.5±1.96) Ω×cm2,共培养体外模型的TEER值为(185.4±3.25) Ω×cm~2.结论:建立的BBB体外模型在形态学.电阻方面具备了BBB的基本特性,并且在星胶存在下共培养模型使BBB形态结构更完整.目的:观察单纯培养BMEC及其与AS共培养两种模型条件下,缺氧-复氧时的变化方法:分别对单独培养BMEC和AS与内皮共培养两个BBB两个体外模型.进行缺氧-复氧处理(缺氧4h,复氧1h,3h,6h,12h,24h),观察两者TEER值与紧密连接蛋白的变化.结果:单独内皮细胞培养时,缺氧后电阻值有显著的下降,为(140.1±2.6) Ω*cm2结论:缺氧后对单层BMEC的BBB模型有一定的破坏作用,在复氧后情况会有改善,但无法恢复到缺钱前状态.下一步进行共培养模型的实验.
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