新型环氧化合物水解酶的纯化、表征及应用研究

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该文对该环氧化物水解酶进行了提纯,比酶活提高了88倍.酶学性质研究表明:以DMSO为助溶剂时,该酶在30℃和pH6.5时酶活最高;该酶在pH7.5时相当稳定,40℃下保存6h没有活力损失;该酶遵从米氏反应动力学,K<,m>和V<,max>分别为12.5mM和4.88μmol·min<-1>·mg protein<-1>;Tween-80能显著提高该酶的活性、热稳定性和对映选择性,30℃时的比酶活提高为1.8倍,而且最适反应温度适移至40℃,50℃时的酶活半衰期提高至2.5倍,对映选择率从41.2提高至69.3.按1:5的相体积比,建立了异辛烷--水两相体系,可克服底物在水相中溶解度低和不稳定的缺限.在该体系中细胞反应的对映选择性(E值)从39.5提高到94.0,反应的最高底物浓度从60mmol/L提高到100mmol/L(底物在有机相中的初始浓度为600mmol/L),并在轴向流搅拌式反应器中实现了对缩水甘油苯基醚的有效拆分,理论收率为44.5﹪,对映体过量值为100﹪.
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