四川猕猴桃软腐病菌的鉴定、遗传多样性及侵染果实后的生理变化研究

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猕猴桃软腐病是猕猴桃采后主要病害之一,每年都会造成巨大经济损失。红阳猕猴桃CActinidia chinensis Planch.var.rufopulpa Liang et Ferguson)是四川猕猴桃主要种植品种,由于红阳猕猴桃大面积种植,单一的遗传背景致使病虫害问题日益突出,特别是采后病害对猕猴桃产业的发展影响很大,其中猕猴桃软腐病是贮藏期的主要病害之一。本研究旨在鉴定四川猕猴桃软腐病菌,同时使用ISSR分子标记技术研究四川猕猴桃软腐病菌的遗传多样性,探讨了遗传多样性与地理来源、致病力间的关系,并用病原菌侵染果实后研究其生理变化,为抗病和抗性材料的筛选奠定基础。采用常规组织分离法对来自四川猕猴桃主产区都江堰、双流、邛崃、蒲江、雅安、苍溪、彭州等地的腐烂猕猴桃果实进行病原菌分离。综合形态学与分子学鉴定,结果表明,猕猴桃软腐病菌为Botryosphaeria dothidea。采用ISSR分子标记技术对分离得到的35个猕猴桃软腐病菌菌株进行遗传多样性分析。结果表明,ISSR分子标记技术能将35个菌株划分为5个类群,遗传距离变化范围为0.077~0.782,平均值为0.389,说明四川猕猴桃软腐病菌多态性较高。比较发现,菌株地理来源与其遗传距离的关系大于致病力与遗传距离的关系,遗传距离、地理来源、致病力强弱之间无明显相关关系。用猕猴桃软腐病菌接种猕猴桃果实后,果实中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性较对照均有大幅提高。其中SOD活性2d后是对照的2.6倍,POD活性是对照的2.2倍,CAT活性在4d后是对照的1.4倍。同时,果实中脯氨酸(Pro)、丙二醛(MDA)含量也增加,3d后分别是对照的1.2倍、2.0倍。结果表明,在病原菌侵染后,寄主细胞通过提高抗氧化酶活性清除自由基,同时积累大量Pro以提高自身渗透调节能力,从而增强抗病能力,减轻细胞受到病原菌伤害。
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