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真菌毒素是由侵染处于生长阶段的作物或存放阶段的谷物的真菌产生的次级代谢产物,一旦通过食物链进入人体后,将可能造成致畸,致突变和致癌等严重危害,因此在全球食品安全中备受关注。本文采取免疫学检测法—酶联免疫吸附法(ELISA),对玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A两种常见的真菌毒素免疫快速检测技术进行了研究,获得以下结果:1)通过活泼酯法将玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成免疫原ZEN-BSA和包被原ZEN-OVA,经紫外扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定后免疫BALB/c小鼠;挑选产生高效价和高敏感性抗体的小鼠进行抗原超强免疫,取脾细胞与SP2/0细胞融合获得一株稳定分泌抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体的杂交瘤细胞(3D8),经鉴定,该抗体亚类为IgG1,轻链为k型。经体内诱生腹水并纯化获得效价达1︰2.048×106的单克隆抗体;建立了基于单克隆抗体的ZEN间接竞争ELISA法(ic-ELISA),该方法IC50和检出限分别为22.89和10.07pg/mL;与α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇和β-玉米赤霉醇的交叉反应率分别为95%,8%,12%,6%和5%,而与黄曲霉毒素B1、呕吐毒素、伏马毒素B1和赭曲霉毒素A未见有交叉反应;在玉米、大麦、小麦和燕麦中加标的回收率在86.4%~104.8%。2)在多克隆抗体的基础上研制了赭曲霉毒素A(OTA)直接竞争酶联免疫检测(cd-ELISA)试剂盒。在0~10ng/mL范围内,该试剂盒50%抑制率(IC50)为1.09ng/mL,检测灵敏度(IC10)为0.06ng/mL;与赭曲霉毒素B、C的交叉反应率分别为6.28%和0.16%,而与黄曲霉毒素B1等生物毒素未见有交叉反应;板内与板间平均变异系数分别为2.21%和2.79%;花生、玉米和玉米粉3种样品中OTA的检测低限分别为1.71,1.26和1.85μg/kg,平均添加回收率在83.80%~91.40%;与HPLC检测方法具有较高的相关性,相关系数(R2)分别为0.94、0.88和0.90;检测时间只需20min,可用于花生、玉米及玉米粉中OTA的批量快速筛查。本研究建立了基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮间接竞争ELISA检测方法,为玉米赤霉烯酮间接竞争ELISA试剂盒的研制奠定了基础,并成功研制了赭曲霉毒素A直接竞争ELISA试剂盒。这将在人工抗原合成,抗体制备和ELISA试剂盒研制方面,为其它真菌毒素小分子的免疫快速检测技术的建立提供宝贵经验。