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目的借助大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,以肥大细胞相关炎症反应为着手点,研究I/R中通心络预给药对缺血再灌注损伤心肌的保护作用及其对肥大细胞脱颗粒诱导的炎症反应的作用机制,探讨通心络对缺血再灌注损伤心肌的保护作用。方法将36只SPF级雄性SD大鼠随机分成假手术组、模型组、通心络组;各组大鼠分别予2ml溶液灌胃一周,其中通心络组予通心络药物(1.0g· kg-1·d-1)灌胃,假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,一周后通过可逆性左冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血再灌注损伤模型(缺血1h,再灌注2h),假手术组仅穿线不结扎。1造模后1Omin和再灌注后2h,分别测心电图;2腹主动脉取血,检测血常规;离心后取血清检测钙离子(calcium,Ca2+)、肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)、乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH),及酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测类胰蛋白酶(tryptase,TPS)和c-fos免疫双标、脾酪氨酸激酶(Spleen tyrosine kinase,Syk)、细胞外信号调节激酶(extracellular regulated kinase,ERK)的磷酸化水平、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT);3取大鼠心肌梗死边缘区组织,采用苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE染色),光学显微镜下观察病理形态学改变;4取大鼠心肌梗死边缘区组织,ELISA法检测旦-氨基己糖苷酶和类糜蛋白酶的水平;采用DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡指数;采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-time Quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测心肌组织PKCε和PKCδmRNA的表达;蛋白质印迹法(Western Blot)检测蛋白激酶(proteinkinase C,PKC)α的表达水平。结果1心电图:模型组较假手术组ST段明显上抬,通心络组较模型组ST段明显回落。2血常规:模型组较假手术组白细胞(white blood cell,WBC)升高(P<0.01),通心络组大鼠WBC、血小板(blood platelet,PLT)水平较模型组降低(P<0.05);各组大鼠红细胞(red blood cell,RBC)数量与血红蛋白(Hemoglobin,HGB)的值均没有显著性差异(P>0.05);Ca2+、CK、LDH:模型组较假手术组Ca2+、CK、LDH升高(P<0.01或P<0.05),通心络组较模型组Ca2+、CK、LDH水平降低(P<0.01或P<0.05);血清中TPS、c-fos、Syk、5-HT、组胺指标:模型组较假手术组升高(P<0.01或P<0.05),通心络组较模型组降低(P<0.01或P<0.05);血清ERK:模型组较假手术明显降低(P<0.01),通心络组较模型组明显升高(P<0.01)。3 HE染色:通心络组大鼠心肌组织炎性细胞浸润及心肌细胞凝固坏死程度均较模型组减轻。4-氨基己糖苷酶和类糜蛋白酶:模型组较假手术组升高(P<0.05),通心络组较模型组降低(P<0.05);心肌凋亡指数:模型组较假手术组升高(P<0.01),通心络组较模型组降低(P<0.01);PKCε和PKCδmRNA:模型组较假手术组明显升高(P<0.01),通心络组较模型组降低(P<0.01);PKC α:模型组较假手术组明显升高(P<0.01),通心络组较模型组降低(P<0.01)。结论1通心络预给药可以减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制与抑制肥大细胞脱颗粒为中心的炎症反应相关;2通心络保护心肌细胞,与其上调抗凋亡基因表达,促进细胞自我修复,抑制心肌细胞凋亡相关;3通心络药物可能通过降低血清中TPS、c-fos、Syk和5-HT炎症指标,促进保护因子ERK的表达,抑制肥大细胞脱颗粒相关的炎症反应,减轻心肌损伤;4通心络保护再灌心肌,可能与降低心肌组织β-氨基己糖苷酶、类糜蛋白酶及PKC表达,抑制肥大细胞脱颗粒有关。