MUC1在IL-13影响的人支气管上皮细胞分泌细胞因子GM-CSF中的作用

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研究背景:粘蛋白1(MUC1)是一种广泛表达于各种粘膜上皮细胞和造血干细胞表面的跨膜糖蛋白,主要分布于呼吸道、胃肠道、泌尿生殖道和乳腺等上皮组织,被认为具有保护、润滑、免疫调节等多项功能。既往研究表明在各种细菌或病毒所致呼吸道感染与炎症中,MUC1可能发挥重要作用。在哮喘发病机制中,气道上皮细胞和树突状细胞之间存在着的交互对话作用,气道上皮细胞分泌GM-CSF、TSLP等细胞因子激活树突状细胞,从而介导了哮喘的Th2免疫应答。但MUC1是否参与调节哮喘气道上皮的功能尚未见报道。目的:探究MUC1在IL-13影响的人支气管上皮细胞分泌细胞因子GM-CSF中的作用方法:1.分别以不同浓度的IL-13(0,20,40,60ng/ml)刺激人支气管上皮(16HBE)细胞24小时。ELISA法分别检测各组上清中细胞因子GM-CSF的浓度。2.以MUC1 si RNA沉默16HBE的MUC1表达,然后IL-13(20ng/ml)刺激细胞24小时。实验分为6组。1组:正常对照;2组:Scrambled si RNA转染;3组:MUC1 si RNA转染;4组:IL-13;5组:Scrambled si RNA转染+IL-13;6组:MUC1 si RNA转染+IL-13。Western Blot检测各组MUC1蛋白的表达;ELISA法分别检测各组上清中细胞因子GM-CSF的浓度。结果:1.16HBE能分泌GM-CSF;与未受刺激细胞比较,IL-13可降低16HBE分泌GM-CSF(p<0.05);不同浓度的IL-13(20,40,60ng/ml)刺激后,16HBE分泌GM-CSF的量无明显差异。(p>0.05)。2.以20ng/ml的IL-13刺激16HBE细胞24h,细胞表达的MUC1蛋白较对照组下降(p<0.05)。3.采用MUC1 si RNA抑制16HBE细胞的MUC1表达,该组GM-CSF的分泌量较相应照组显著减少(p<0.01)。结论:IL-13能抑制人支气管上皮细胞分泌GM-CSF,可能是通过抑制MUC1的表达而实现的。
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