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本论文主要研究确定了草鱼(Ctenopharyngodonidella)对饲料中蛋白质和必需氨基酸的需要量,共分两章六节。
主要内容如下:1.以酪蛋白和明胶(4∶1)为蛋白源,糊精为糖源配制六种等能(消化能3350kcal/kg)的梯度蛋白纯化实验饲料(蛋白含量为18.0,23.4,28.8,34.2,39.6和45.0%),在室内循环水族箱系统饲养初始体重为7.44±0.02克的草鱼56天,研究饲料中蛋白水平对草鱼生长性能、营养利用、体组成、表观消化率和血液生化指标的影响,确定草鱼对饲料中的蛋白质的需求量。实验结果显示:草鱼末重、特定生长率和饲料效率随着饲料中蛋白含量的上升而上升,当饲料蛋白含量达40%时达到峰值,之后更高的饲料蛋白没有显著提高生长和饲料利用(P>0.05)。蛋白质效率和氮保留率则是显示出与饲料效率相反的趋势。除了45%蛋白组的全鱼水分稍高外,全鱼、肌肉、肝脏的水分含量均不受到饲料蛋白水平的显著影响(P>0.05)。随着饲料中蛋白质水平的升高,草鱼的肥满度、脏体比、肝体比、脂体比、糖的表观消化率以及血浆胆固醇和甘油三酯含量均保持着下降的趋势(P<0.05),而蛋白、脂肪和能量消化率则是相反地上升(P<0.05)。血浆中总蛋白和血糖含量没有受到饲料蛋白水平的显著影响(P>0.05)。以特定生长率为因变量,应用折线模式得出,当饲料中可消化能为335kcal/g时,初重为7.43克左右的草鱼达到最快生长所需求的最适蛋白含量为39.14%,或者每天每千克体重需要11.7克蛋白;维持蛋白需要量为每天每千克体重需要2.96克蛋白。
2.以明胶和酪蛋白为蛋白源,糊精为糖源,设计两个糖水平(20%和40%)和三个蛋白水平(20%,29%和38%),配制6个不同的蛋白能量梯度(DP/DE从7.48到13.98g/kcal)的纯化饲料,对草鱼进行了8周的摄食生长实验,目的在于研究来自糊精的消化能对蛋白质的节约作用是否存在,以及确定饲料中不同的蛋白能量比(糖和蛋白比例)对草鱼幼鱼生长性能、体组成、营养素利用和血液学指标的影响。结果表明:当饲料中含有38%蛋白、20%糊精和蛋能比为139毫克蛋白/千卡时草鱼的生长最佳。在相同的糖水平下,随着蛋白质上升草鱼增重率、特定增长率和饲料效率呈现线形地显著提高(P<0.05),蛋白质效率和氮保留率则相反;在相同蛋白水平下,高糖(40%)组的草鱼增重率、特定增长率、饲料效率、蛋白质效率和氮保留率都比低糖(20%)组的显著差(P<0.05)、脂肪保留率都显著地高于低糖组(20%)(P<0.05)。饲料中蛋白能量比和增重率的关系呈现出典型的“∽”形状。全鱼、肝脏的生化组成以及肥满度、脏体比、肝体比和脂体比显著受到饲料中蛋能比的影响(P<0.05),全鱼脂肪含量和脂体比均与蛋能比具有极好的负相关性,肝脏蛋白含量则与蛋能比具有极好的正相关性。血浆中总蛋白和胆固醇含量没有受到饲料蛋能比的显著影响(P>0.05),甘油三酯含量在组间虽然没有统计学上差异(P>0.05),但与饲料中蛋能比具有较好的负相关性,葡萄糖含量则与饲料中蛋能比具有较好的正相关性。血尿氮在38%蛋白水平下显著的低(P<0.05)。饲料中添加过高含量的糊精对草鱼的生长有抑制作用,导致饲料效率、蛋白质效率、氮保留率和鱼体水分的下降,同时增加鱼体和肝脏的脂肪含量。根据生长和饲料效率得出,草鱼饲料中的最佳蛋能比为139毫克蛋白/千卡。但从经济的角度出发,含有29%蛋白,20%糊精和可消化蛋能比为123毫克蛋白/千卡的饲料配方也可推荐。
3.通过配置一系列蛋氨酸水平的饲料对草鱼进行为期70天的摄食生长实验,目的在于确定草鱼饲料中蛋氨酸的适宜需要量,并计较分析饲料中蛋氨酸水平对草鱼鱼体生化、血液生化以及消化率的影响。配制9种等氮等能饲料,以酪蛋白和明胶为蛋白源,补充包膜结晶氨基酸配制成八种蛋氨酸梯度饲料(蛋氨酸占饲料干重分别为0.35%、0.52%、0.69%、0.85%、1.02%、1.19%、1.36%和1.53%),其氨基酸组成模拟蛋白为37%草鱼全鱼氨基酸模式,另外设置一种结合态蛋白的对照组饲料。实验结果表明,对照组的增重率、特定生长率、饲料效率、全鱼蛋白和脂肪含量等均最高(P<0.05)。饲喂氨基酸料的草鱼增重率、特定生长率、饲料效率、蛋白质效率、氮保留率、脂肪保留率、全鱼水分和蛋白含量均随蛋氨酸水平上升而上升(P<0.05),在1.02%蛋氨酸水平出现最高值,随后稍有下降的趋势。全鱼脂肪与水份呈相反的变化趋势,肝脏脂肪含量与饲料蛋氨酸水平有着较好的负相关性。本实验没有观察到蛋氨酸水平影响存活率和蛋氨酸缺乏症。蛋白质和脂肪的表观消化率都很高,饲料溶失率随着浸泡时间的延长呈现线性地上升。根据特定生长率和蛋氨酸含量的二次回归拟合模型得出,当每千克饲料中含有4克氯化胆碱,25000个国际单位维生素A,消化能为11.78兆焦耳,蛋白质消化率为92.4%时,草鱼幼鱼饲料中的适宜蛋氨酸需要量为占饲料干重1.10%或者占蛋白含量的2.97%或者0.934克/兆焦消化能,加上饲料中胱氨酸含量,则饲料中总含硫氨基酸的需要量为占饲料干重1.21%或者占蛋白含量的3.27%或者1.027克/兆焦消化能。如果再考虑到结晶氨基酸的溶失,实际蛋氨酸需要量可能比本实验所得需要量稍低。
4.为了确定草鱼的赖氨酸需要量,本实验采用六组等氮等能(蛋白质含量为38%,可消化能为14MJ/kg)的赖氨酸梯度饲料(从0.71%-3.16%饲料干重)对初重为3.15±0.01g的草鱼稚鱼进行了90天的摄食生长实验。各组配合饲料以玉米面筋、酪蛋白、明胶作为蛋白源,外源补充预包膜结晶氨基酸模拟草鱼全鱼体蛋白氨基酸模式;日投喂率为2.5%,分五次投喂。实验期间草鱼没有发生死亡现象,未发现赖氨酸缺乏症,但低水平赖氨酸饲料表现出生长受阻。结果显示,增重率、特殊生长率、饲料效率、蛋白质效率、营养成份存留、全鱼成份、形体指标均显著受饲料赖氨酸水平影响(P<0.05)。2.18%赖氨酸组的增重率、饲料效率均显著高于其他各组。肥满度、脏体比、肠脂比以及干物质、蛋白质、脂肪、能量的表观消化率和赖氨酸的表观消化率没有受到饲料赖氨酸水平的显著影响(P>0.05),肝体比随着饲料中蛋氨酸水平上升而上升。血浆中总蛋白、胆固醇、甘油三酯和葡萄糖含量随着饲料中赖氨酸水平升高到2.18%而有上升的趋势。基于增重率对饲料蛋氨酸水平做二次回归分析,得出当赖氨酸占饲料干重中2.24%水平,相对于占饲料蛋白质5.89%水平时,可使草鱼幼鱼获得最佳生长。当考虑到92.37%的赖氨酸利用效率,草鱼幼鱼赖氨酸需要量则为饲料干重的2.07%、对应于占饲料蛋白质5.44%。
5.在室内循环水族箱系统饲养初始体重为4.90±0.06克的草鱼56天,采用生长研究法为主,血液分析法为辅助,综合确定草鱼对饲料中精氨酸的需求量以及不同的精氨酸水平对草鱼营养利用、体组成、表观消化率和血液生化等指标的影响。以酪蛋白和明胶为蛋白源,设计的基础饲料,通过外加包膜结晶精氨酸,配制占饲料干重分别为1.01%、1.38%、1.75%、2.12%、2.49%和2.86%的等氮(蛋白质37%)等能(11.78MJ/kg)六个精氨酸梯度饲料;除了精氨酸外,外源补充氨基酸的组成模拟蛋白为37%的草鱼全鱼的氨基酸组成。实验结果表明:增重率、特殊生长率、饲料效率、蛋白质效率、营养素保留率、全鱼成份、形体指标均显著受饲料精氨酸水平影响(P<0.05)。2.14%精氨酸组的增重率、饲料效率均显著高于其他各组。随着饲料中精氨酸水平的上升,肥满度、脏体比和肝体比显著地下降,脂体比则是显著地上升(P<0.05)。精氨酸0.99%组的总蛋白、胆固醇、甘油三酯水平和谷丙转氨酶活性都是最高的(P<0.05),其他各组间均没有统计学上的显著差异(P>0.05);随着饲料中精氨酸水平升高,血浆中甘油三酯有下降的趋势,尿氮和游离精氨酸则有着上升的趋势。根据折线模式可以估算出草鱼幼鱼对饲料中精氨酸的适宜需要量为饲料干重的1.89%,对应于占蛋白质干重4.97%。
6.为了利用各种不同的参考蛋白氨基酸模式估算草鱼对必需氨基酸的需要量,对初重为3.93±0.03克的草鱼进行了10周的生长实验,研究比较了五种氨基酸模式(红鱼粉、草鱼幼鱼全鱼、草鱼卵、鸡蛋和大豆蛋白模式)的饲料对草鱼生长性能、体组成、营养素利用率以及血液学指标的影响,并设置了一个以明胶和酪蛋白为结合态蛋白作为对照组。配制6组等氮(粗蛋白38%)等能的饲料,1-5号饲料以明胶、酪蛋白(1∶2)和结晶氨基酸为蛋白源,外加包膜结晶精氨酸模拟五种氨基酸模式,6号对照组饲料以明胶、酪蛋白(1∶2)为蛋白源。实验结果显示:草鱼的增重率、特殊生长率、饲料效率、蛋白质效率、营养素保留率、全鱼、肝脏生化组成、脏体比、肝体比、脂体比、鱼体氨基酸组成以及各种必需氨基酸的保留率均受到了饲料氨基酸模式的显著影响(P<0.05),肌肉生化组成、肥满度、血浆中甘油三酯和葡萄糖含量以及谷丙转氨酶活性没有受到饲料不同氨基酸模式的显著影响(P>0.05)。对照组草鱼具有最高的增重率、特殊生长率、饲料效率、蛋白质效率、营养素保留率、血浆胆固醇、葡萄糖含量以及谷丙转氨酶活性。模拟处理组中,增重率和特定增长率由高到低的顺序依次为红鱼粉蛋白组、草鱼全鱼蛋白组、草鱼卵蛋白组、鸡蛋蛋白组和大豆蛋白组。与草鱼卵蛋白、鸡蛋蛋白和大豆蛋白相比,红鱼粉蛋白和草鱼鱼体蛋白的氨基酸模式更适合作为草鱼的理想参考氨基酸模式。