不同化学官能团对Mg-63成骨肉瘤细胞的影响

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目的:  材料表面的化学性和细胞对材料的应答在生物医学,再生医学,组织工程学和生物传感器等领域起着重要的作用。材料表面的化学性可以影响蛋白的吸附,细胞的激活等等。通过对材料表面的改善可以使细胞行为在合成材料上起着变化,细胞粘附、形态、动力、基因表达和分化等方面的改变都与材料表面的特性相关。利用自组装膜技术(SAMs)可以在金片上形成均匀的末端带有不同的化学官能团的单层分子膜,其中末端的化学官能团包括甲基-CH3,羧基-COOH,羟基-OH,氨基-NH2,巯基-SH等等。本实验选取了甲基-CH3,羟基-OH,羧基-COOH,氨基-NH2,巯基-SH化学官能团,观察其对MG-63成骨肉瘤细胞的粘附和增殖方面的影响。  方法:  1、化学官能团的制备及表征:首先,采用离子束溅射技术在单晶硅基底片上形成一层稳定的金,再根据实验的要求利用自组装膜技术,在金片上制备头基分别为甲基-CH3,羟基-OH,羧基-COOH,氨基-NH2,巯基-SH的化学官能团,当化学官能团嫁接到金基底片时,对嫁接好的材料表面进行表征,确定基底金片上的化学官能团的密度相等,使唯一的变量就是头基不同的化学官能团。  2、化学官能团对MG-63成骨肉瘤细胞粘附、增值实验:培养MG-63成骨肉瘤细胞,扫描电镜观察MG-63成骨肉瘤细胞在嫁接到化学官能团上24小时后的粘附情况以及用MTT方法测量MG-63成骨肉瘤细胞在嫁接到化学官能团表面上后第1、3、5天的增殖情况。实验结果表明,在不同化学官能团上MG-63成骨肉瘤细胞的粘附情况和增殖情况有着明显的差异。扫描电镜中在-OH化学官能团表面,MG-63成骨肉瘤细胞粘附后的伸展面积最大,细胞呈现多种形态,与其它细胞间有粘附连接。在最疏水的-CH3化学官能团表面,MG-63成骨肉瘤细胞粘附后的伸展面积最小,细胞呈现长梭形。在MTT测量MG-63成骨肉瘤细胞增殖情况时,在-NH2,-COOH,-OH化学官能团表面,细胞呈现明显增殖,在-CH3和-SH化学官能团表面细胞呈现明显抑制状态。  结论:  化学官能团能够影响细胞的粘附和增殖情况,而细胞的粘附情况可以影响着细胞的增殖,迁移等其他的行为。-CH3化学官能团是最为疏水的,是非极性的化学基团,不利于细胞的粘附,细胞与材料表面的接触面积较小,抑制细胞的生长。-OH化学官能团最为亲水,利于细胞的粘附和生长,细胞与基底材料表面接触面积较大,与周边的细胞有粘连,促进细胞的增殖。  综上结果,我们可以利用材料表面的特性,采用组织工程学的手段,将甲基能够抑制肿瘤细胞增殖的这一特性嫁接到工程材料上,进行深一步的实验研究,将研究结果利用到MG-63成骨肉瘤的治疗中,为肿瘤的治疗提供新的方向和应用,对癌症治疗起着重要的意义。
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