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喜树（Camptotheca acuminata Decne.）是我国南方特有树种,它所含的喜树碱（Camptothecin, CPT）是一种具有显著抗癌活性的生物碱,也是迄今为止发现的唯一一种拓扑异构酶Ⅰ（Topoisomerase Ⅰ, Topo Ⅰ）抑制剂,被誉为21世纪人类首选的3大抗癌药物之一。本试验探讨了诱导喜树愈伤组织的最佳培养基,以及外植体类型和取材季节对愈伤组织诱导的影响,并采用高效液相色谱法（HPLC）对CPT的提取方法、不同处理条件下愈伤组织中CPT的含量变化,以及叶片中CPT含量的季节变化进行研究,结果如下: 1.本试验的最佳色谱条件为:以乙腈/水（V/V=30/70）为流动相,流速1.0 ml/min,柱温25℃,进样量20μ1,检测波长254 nm。在该色谱条件下喜树碱的保留时间适中,约为6.3 min,峰形良好。 2.提取CPT的最佳方法为95%乙醇索氏回流提取,样品不经任何处理,测得提取液中CPT含量极显著的高于95%乙醇超声提取和0.3%NaOH溶液碱法提取。 3.以嫩叶和带芽茎段为外植体,在MS+NAA1.0 mg/L+IBA1.0 mg/L+KT0.1 mg/L培养基上,愈伤组织的诱导率高,30d时统计可达90.0%以上,愈伤组织质地好、生长迅速;以嫩叶为外植体诱导的愈伤组织,在MS+NAA0.05 mg/L+6-BA0.25mg/L+KT0.5 mg/L培养基上不能分化出不定芽,而以茎段为外植体诱导的愈伤组织,在MS+NAA0.05 mg/L+6-BA0.25 mg/L+KT0.5 mg/L培养基上诱导分化不定芽,30 d后统计芽分化系数可达4.2。 4.SH基本培养基较1/2MS、MS、B5和White 4种基本培养基更有利于愈伤组织中喜树碱的积累。在SH基本培养基上,以嫩叶为外植体诱导的愈伤组织的CPT含量最高,可达0.0382‰,显著高于以茎段和叶柄为外植体诱导的愈伤组织。 5.最佳取材季节为7月,在SH+NAA1.0 mg/L+IBA1.0 mg/L+KT0.1 mg/L培养基上,愈伤组织中CPT含量可高达0.0412‰,愈伤组织诱导率也较高,为82.2%,外植体污染率为18.5%。 6.NAA和IBA对CPT的积累有显著影响,最佳处理浓度均为3.0 mg/L,在此浓度下处理10 d后,愈伤组织的CPT含量分别高出对照（CK）25.7%和11.4%,愈伤组织的存活率均能达到90%以上。