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目的:通过研究TGF-β1与其受体TGFBR1和胃癌的发生及发展的直接相关性,找出判断胃癌预后的一个重要指标,为胃癌患者个体化治疗提供可靠的依据,并为胃癌的靶向治疗提供证据。内容:转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)是生物学中一种多功能因子,属于一组能够有效调节机体细胞生长和分化的TGF-β超家族。人类机体多种细胞均可产生非活性状态的TGF-β。而非活性状态的TGF-β在调节信号的作用下被激活,从而发挥促进细胞生长和增值的作用。通常在生长和分化活跃的细胞中可以检测到较高水平TGF-β。作为分化活跃的肿瘤细胞中也有有研究报道检测到TGF-β蛋白的存在。有诸多报道表明TGF-β1参与了多种肿瘤的发生和发展过程,例如乳腺癌、肺癌、肝癌、胃癌等,包括其中的分子生物学机制也有所阐述。目前TGF-β发现有四种常见的亚型,而其中TGF-β1可能直接参与了胃恶性肿瘤的发生和发展。相应的TGF-β在细胞表面都有受体存在,分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型三种表达形式。正常情况下配体与受体结合后将信号传入细胞内才能发挥生物学作用。因此信号转导通路对机体细胞维持正常功能也至关重要。有研究发现转化生长因子-β1受体(TGFBR1)的表达异常或缺乏,使得TGF-β1无法与其结合,从而导致了胃癌的发生,并促进肿瘤细胞的增长和迁移,从而使其摆脱了TGF-β1的抑制作用,这更加剧了肿瘤的发生和继续发展。有文献报道,TGFBR1可能存在抑癌作用,它通过抑制机体细胞的过度分化、增殖来避免细胞的恶性复制。因此,在本研究中我们设计了胃癌细胞TGFBR1抑制表达和过度表达实验,来观察TGFBR1与胃癌的关系,并对胃癌、癌旁及正常组织中TGF-β1的表达进行检测,评估后者与胃癌的关系,并探讨上述两者在胃癌的发生、发展过程中的共同作用。方法:培养人胃癌细胞系的SGC-7901细胞,分离m RNA。使用靶向人TGFBR1si RNA序列对SGC-7901细胞进行转染,将TGFBR1表达调低,并作阴性对照,未经转染的SGC-7901细胞作阳性对照。用TGFBR1过度表达的质粒对SGC-7901细胞进行转染,作阳性对照,空质粒作阴性对照。行q-PCR,Western blot测定TGFBR1 m RNA和其蛋白表达水平。随后用Transwell实验来测定SGC-7901细胞的迁移情况。另外我们选取天津医科大学肿瘤医院2018年2～9月进行的胃癌切除手术患者的胃癌、癌旁及正常胃黏膜组织标本,共434例。将标本制作做病理切片,并用免疫组织化学方法分别检测了其中TGF-β1的蛋白表达。用万能正置荧光显微镜及成像系统进行拍照。分别对镜下阳性细胞的百分比和染色程度给予评分,根据评分分阳性等级。胃癌组织作为TGF-β1表达的阳性对照,正常胃黏膜组织作为TGF-β1表达的阴性对照,对比TGF-β1在两者中的表达。在阳性组中根据阳性等级对早期胃癌和进展期胃癌,以及胃癌分化程度和TNM期进行了比较,最后行统计学分析。结果:被转染的SGC-7901细胞TGFBR1的m RNA和蛋白质水平显著低于未被转染的SGC-7901细胞,提示TGFBR1被靶向人TGFBR1的si RNA显著抑制。而过度表达质粒组的TGFBR1 m RNA和蛋白水平显著高于空质粒组。Trans well分析表明,抑制表达的TGFBR1显著地增强了胃癌细胞迁移,而TGFBR1的过度表达抑制了细胞迁移。在TGF-β1蛋白表达中,我们发现胃癌组织阳性占比为98.73%,胃癌旁组织阳性占比为1.27%,而正常胃组织阳性占比远低于胃癌组织,为0%,差异有统计学意义(P<0.05)。在早期胃癌病例中TGF-β1弱阳性例数58例,在进展期胃癌阳性例数58例,差异有统计学意义(P<0.05)。TGF-β1表达与肿瘤分化程度、TNM分期有关,分化程度越低,阳性等级越高,TNM分期越晚,阳性等级越高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:研究表明TGF-β1与TGFBR1可能共同参与胃癌发生、发展,其中TGF-β1表达与胃癌发生及发展呈正相关,其受体TGFBR1的表达减少或缺失与胃癌细胞的迁移有关。TGF-β1今后有望成为判断胃癌预后的一个重要指标,为胃癌患者个体化治疗提供可靠的依据。这也为今后胃癌的靶向治疗提供了很好的证据。