【摘 要】
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研究背景:结肠癌的发病率和死亡率位于全世界第三位,一直是当代研究热点,其中复发转移是患者病情进展、死亡的最主要缘由。随着分子靶向药物和新型诊疗技术的运用,患者生存率较前有改善,但总体预后不佳,因此研究肿瘤侵袭转移的分子机制对抑制结肠癌转移、改善预后具有重要意义。异常组蛋白表观修饰在恶性肿瘤发生演进中发挥关键作用,但在结肠癌侵袭转移领域研究尚少。我们前期通过文献找出常见的组蛋白表观修饰酶,同时对GE
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研究背景:结肠癌的发病率和死亡率位于全世界第三位,一直是当代研究热点,其中复发转移是患者病情进展、死亡的最主要缘由。随着分子靶向药物和新型诊疗技术的运用,患者生存率较前有改善,但总体预后不佳,因此研究肿瘤侵袭转移的分子机制对抑制结肠癌转移、改善预后具有重要意义。异常组蛋白表观修饰在恶性肿瘤发生演进中发挥关键作用,但在结肠癌侵袭转移领域研究尚少。我们前期通过文献找出常见的组蛋白表观修饰酶,同时对GEO数据库进行生物学信息分析获得结肠癌组织中差异表达的基因,两者取交集,发现组蛋白甲基转移酶SMYD3在结肠癌组织中高表达,生存曲线分析表明高表达组预后差,据此推测组蛋白甲基转移酶SMYD3可能在结肠癌侵袭转移中发挥重要作用。本课题拟通过细胞生物学、蛋白质组学、转录组学等方面探究其在结肠癌侵袭转移中的作用及机制。研究方法:1、运用生物信息学技术分析GEO结肠癌数据库中差异表达的表观修饰酶,其中组蛋白甲基转移酶SMYD3排位靠前。2、利用Western B1ot、qRT-PCR验证SSMYD3在结肠癌组织及细胞系中表达情况。3、免疫组化检测结肠癌临床样本中SMYD3的表达水平,统计分析其与患者预后之间的相关性。4、构建Flag-SMYD3过表达和SMYD3-shRNA干扰慢病毒质粒,慢病毒包装获取病毒上清。5、在结肠癌细胞系中感染SMYD3过表达或干扰病毒上清,筛选得到稳转细胞系,划痕和transwell侵袭实验检测SMYD3对肿瘤细胞运动侵袭能力的影响。6、利用免疫共沉淀及蛋白质质谱技术筛选出与SMYD3相互结合的蛋白分子YBX1。7、RNA-seq分析SMYD3与结合蛋白的共同下游基因并做KEGG富集分析。研究结果:通过生物信息学分析和免疫组化染色表明高表达组蛋白甲基转移酶SMYD3的结肠癌患者预后不良;细胞功能学实验证明SMYD3促进肿瘤细胞运动侵袭;免疫共沉淀及蛋白质质谱分析表明SMYD3与转录因子YBX1形成蛋白复合体;RNA-seq分析出SMYD3的下游调控基因,然后与GEO数据库中YBX1调控的基因取交集,KEGG富集分析发现SMYD3/YBX1的共同下游基因参与多种肿瘤相关信号通路。以上结果提示,SMYD3/YBX1蛋白复合体可通过调控肿瘤相关信号通路促进结肠癌侵袭转移。结论:本研究发现了一个新蛋白复合体SMYD3/YBX1,目前尚未见报道。本研究提示组蛋白甲基转移酶SMYD3协同YBX1共同调控肿瘤相关信号通路促进结肠癌侵袭转移,有望为结肠癌患者诊治提供新的分子靶点和理论依据。
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研究背景整合素受体αvβ3在肿瘤新生血管及部分肿瘤细胞中高表达。课题组前期利用RGD环肽可与整合素αvβ3受体特异性结合特点,以小分子化合物将两个RGD环肽与siRNA分子通过共价偶联得到biRGD-siRNA分子,用于肿瘤靶向治疗。biRGD-siRNA可通过RNA干扰原理靶向沉默目的基因的表达,在基因水平治疗疾病。前期结果提示biRGD-siRNA分子可增强细胞摄取、促进内体释放并靶向体内肿瘤
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研究背景和目的随着世界经济快速发展,生活节奏的加快,以及生活环境中致病因素的增多,导致受创面问题困扰的患者也在日渐增多。创面的修复治疗仍是世界各国卫生组织都关注的问题,因此创伤修复和组织再生的研究不仅具有重要的理论意义,而且还是我们迫切需要解决的民生问题。虽然创面的延迟愈合机制尚仍不十分明确,但是通过基础实验研究及临床治疗的观察,认为创面愈合延迟的病理生理机制可能是创面局部生长因子及其受体数量减少
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