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目的:采用低、中、高剂量混合砷(As3+和As5+)、5-杂氮-2′-脱氧胞苷（5-Aza-DC）、莱菔硫烷（SFP）处理家兔,研究砷和处理因素对Keap1-Nrf2-ARE通路基因表达调控的影响及其与砷代谢改变的关系。方法:清洁级家兔90只,雌雄对半,按体重随机分为空白对照组、低剂量砷组(0.075mg·kg-1·w-1)、低剂量砷+5-Aza-DC组、低剂量砷+SFP组;中剂量砷组(0.15 mg·kg-1·w-1)、中剂量砷+5-Aza-DC组、中剂量砷+SFP组;高剂量砷组(0.75mg·kg-1·w-1)、高剂量砷+5-Aza-DC组、高剂量砷+SFP组,共10组,每组9只。家兔自由饮水,连续染毒14周,取家兔第9周尿液和第14周皮肤、血液、尿液获取实验数据。1.染毒结束后,家兔背部相同部位,剃毛、备皮、取皮,在电镜下观察皮肤组织结构的变化。2.采用高效液相（HPLC）-氢化物发生原子分光光度法（HGAFS）检测家兔尿液和皮肤中无机砷（iAsⅢ、iAsⅤ）、DMA和MMA含量,并计算PMI、SMI。3.采用甲基化特异性PCR（MSP）检测家兔皮肤、全血Nrf2、Keap1、Bach1、As3MT、N6AMT1基因甲基化情况。4.采用蛋白印迹法（Western blotting）检测各组家兔皮肤和全血中磷酸化Nrf2（pNrf2）蛋白的磷酸化水平。结果:1.家兔皮肤电镜切片结果表明:砷能使基低细胞生长异常和加重皮肤角化紊乱,5-Aza-DC加入后使基细胞层生长异常加重,SFP加入后可以轻微缓解皮肤角化紊乱。2.砷甲基化代谢水平:（14周皮肤和尿液）与空白对照组比较:皮肤As3+、DMA、MMA、TAs高剂量砷组,尿液As3+、DMA、TAs低、中、高剂量砷组,以上负荷水平均有差异（均有P<0.05）。与低剂量砷组比较:皮肤、尿液As3+、DMA、MMA、As5+、TAs高剂量砷组,尿液PMI高剂量砷组;皮肤As3+低剂量砷+SFP组,尿液As3+、DMA、MMA、TAs低剂量砷+SFP组,尿液As3+、MMA、TAs、PMI低剂量砷+5-Aza-DC组,以上负荷水平均有差异（均有P<0.05）。与中剂量砷组比较:皮肤MMA中剂量砷+SFP组,尿液As3+、DMA、MMA、TAs、PMI中剂量砷+SFP组、中剂量砷+5-Aza-DC组,以上负荷水平有差异（P<0.05）。与高剂量组比较:尿液DMA、As5+、TAs、PMI高剂量砷+SFP组,As5+、PMI高剂量砷+5-Aza-DC组,以上负荷水平均有差异（均有P<0.05）。与低剂量砷+5-Aza-DC组比较:皮肤As3+、DMA、MMA、As5+、TAs、PMI高剂量砷+5-Aza-DC组,尿液As3+、DMA、MMA、TAs、PMI中、高剂量砷+5-Aza-DC组,以上负荷水平有差异（均有P<0.05）。9周尿液:与空白对照组比较:PMI低剂量组,As3+、DMA、MMA、TAs、PMI高剂量砷组负荷水平有差异（均有P<0.05）;与低剂量组比较:PMI中剂量砷组,As3+、DMA、MMA、TAs高剂量砷组负荷水平有差异（均有P<0.05）;与中剂量组比较:As3+、DMA、MMA、TAs、PMI高剂量砷组负荷水平有差异（均有P<0.05）。9周与14周比较:与9周低剂量组比较:As3+、MMA、As5+、TAs 14周低剂量砷组负荷水平上调（t=-16.82、t=-4.43、t=-6.16、t=-3.45、t=11.45、t=20.15,均有P<0.05）,PMI、SMI 14周低剂量砷组负荷水平下调（t=11.45、t=20.15,均有P<0.05）。3.基因甲基化水平:与空白对照组比较:皮肤高剂量染砷组Keap1基因甲基化率,全血中、高剂量染砷组Keap1基因甲基化率呈升高趋势（皮肤χ2=8.96,P=0.003;全血均有χ2=6.13,P=0.013）;与同剂量砷组比较:全血高剂量砷+SFP组、高剂量砷+5-Aza-DC组、皮肤高剂量砷+5-Aza-DC组Keap1基因甲基化率呈降低趋势（χ2=6.13,P=0.013;χ2=11.03,P=0.001;χ2=8.416,P=0.004）,中剂量砷+5-Aza-DC组Bach1基因甲基化率呈升高趋势（χ2=6.13,P=0.013）,高剂量砷+5-Aza-DC组Bach1基因甲基化率呈降低趋势（χ2=6.13,P=0.013）。4.磷酸化Nrf2（pNrf2）蛋白的磷酸化水平:与空白对照组比较:皮肤中剂量砷组、高剂量砷组蛋白表达量有差异（均有P<0.001）,全血低剂量砷组、中剂量砷组蛋白表达量有差异（P<0.001、P=0.023）。与低剂量砷组比较:皮肤、全血中剂量砷组、高剂量砷组,低剂量砷+SFP组蛋白表达量有差异（皮肤均有P<0.001;全血P<0.001、P<0.001、P=0.005）。与高剂量组比较:皮肤、全血高剂量砷+SFP组、皮肤高剂量砷+5-Aza-DC组蛋白表达量有差异（皮肤P=0.001,P=0.005;全血P=0.001）。与低剂量砷+5-Aza-DC组比较:皮肤、全血高剂量砷+5-Aza-DC组蛋白表达量有差异（皮肤P=0.005;全血P=0.006）。结论:低砷暴露促进pNrf2蛋白表达,激活Nrf2通路;高砷暴露抑制pNrf2蛋白表达,抑制Nrf2通路,存在剂量依赖性,并与砷代谢相互影响。砷暴露可致家兔皮肤、全血中Keap1基因甲基化率升高;SFP可致全血中Keap1基因甲基化率降低;5-Aza-DC可致皮肤、全血Keap1、Bach1基因甲基化率降低;Nrf2通路基因表达调控可能影响皮肤、尿液砷甲基化代谢过程。