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黑盖木层孔菌(Phellinus nigricans)菌丝体经水提得菌丝体多糖PNW,通过正交试验确定菌丝体多糖的最优提取工艺为提取温度100℃,浸提4次,每次2h,浸提比(质量比)1:30,各因素影响大小的次序是:提取次数>浸提比>浸提时间。
GC分析PNW的组成:由甘露糖和葡萄糖构成(摩尔比2.68:1.00)。
经冻融分级、醇沉分级、脱蛋白、DEAE-纤维素柱层析和Sepharose CL-6B柱层析等方法,从PNW中纯化出均一多糖PNW1。HPLC检验为单一峰,平均分子量为33 KDa。GC分析PNW1由半乳糖、甘露糖、葡萄糖和少量的阿拉伯糖和岩藻糖组成,摩尔比为:8.77:6.44:3.26:1.00:1.35。
对PNW1的结构分析采用了部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化等化学分析方法及IR、GC、GC/MS、<13>C-NMR等仪器分析方法。确定了PNW1结构的重复单元。
初步考察了PNW和PNW1对小鼠体外脾淋巴细胞增殖的影响,结果显示PNW和PNW1有增强脾淋巴细胞增殖的作用,PNW1的作用效果优于PNW。PNW和PNW1还可以促进ConA诱导的T淋巴细胞增殖作用和LPS诱导的B淋巴细胞增殖作用。