桑天牛卵寄生蜂生殖生理特性及其种群遗传多样性的研究

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:liongliong545
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桑天牛卵寄生蜂对桑天牛的为害有显著的抑制作用,其野外寄生率可高达50%。因此,保护、放养桑天牛卵寄生蜂具有较高的应用价值。但如何增强桑天牛卵寄生蜂的生防效能是目前亟待解决的问题。本论文利用PCR扩增分子检测技术、RAPD—PCR技术和SDS不连续垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳等实验方法,分别从桑天牛卵寄生蜂与Wolbachia的关系、桑天牛卵寄生蜂与寄主桑天牛的关系及桑天牛卵寄生蜂与其他近缘种的关系等三个方面来研究该蜂,所得数据经过处理分析,得出以下结论。1.用wsp、ftsZ和16S rDNA特异性基因引物和相应的PCR反应体系及条件能够快速、准确地扩增出米蛾体内wolbachia的相应基因片段,说明引物和条件适用于检测与米蛾感染同种wolbachia的昆虫。而使用wsp、ftsz和16S rDNA特异性基因引物和相同的PCR条件,在桑天牛卵啮小蜂的DNA中未扩增出任何片断,可能是由于桑天牛卵啮小蜂体内感染的wolbachia与米蛾体内的wolbachia不属于同一株系,所以未检测到;也有可能是桑天牛卵啮小蜂体内未感染wolbachia或者感染率较低所致。2.聚类分析的结果表明,来自6个不同地理区域的桑天牛卵寄生蜂聚为2类,第1类含5个区域,并且又可分成3个亚类:第Ⅰ-1类包括来自保定和唐县的桑天牛卵寄生蜂,第Ⅰ-2类仅有来自迁安的桑天牛卵寄生蜂,第Ⅰ-3类包括来自易县和山东(泰安)的桑天牛卵寄生蜂,其中,第Ⅰ-1类和第Ⅰ-2类均来源于河北省;第Ⅰ-3类中的易县来源于河北省,泰安来源于山东省。第Ⅱ类含1个区域,为来自武昌的桑天牛卵寄生蜂,源于湖北省。3.从酯酶同工酶的图谱中可以看出,来自6个不同地理区域的桑天牛卵寄生蜂分别表现为9、10、8、8、8和7条谱带。谱带最多的为10条,是来自唐县的桑天牛卵寄生蜂;最少的为7条,是来自湖北(武昌)的桑天牛卵寄生蜂。在多态性带中,有6个位置上的谱带为共同具有的谱带,但有1个位置上唐县的带宽一些,湖北的带深一些。有4个位置上的谱带为区域特有带,1个为唐县单独具有,且颜色深些;另3个为湖北单独具有,1个颜色较深,2个带缺失。结果表明,湖北的桑天牛卵寄生蜂与其他区域的桑天牛卵寄生蜂差异较大。4.蛋白质在生物的一生当中变化是较大的,在一定程度上反映了生物的发生发展过程。采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳方法比较了桑天牛卵啮小蜂寄生对桑天牛卵内蛋白质变化的影响。从全蛋白电泳图谱的结果看,桑天牛卵啮小蜂的寄生改变了整个桑天牛卵内蛋白质的变化,甚至使变化开始复杂化。前3d的蛋白质条带变化较为明显,刚寄生1d的桑天牛卵内出现三条谱带,未被寄生的卵内却没有,第二天时就一块消失了。这一时期出现与寄生和抗寄生有关的特异性蛋白质的可能性较大。
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