一个甘蓝型油菜矮秆突变体株高主效基因的精细定位

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油菜是我国重要的油料作物之一,倒伏会导致油菜减产并造成收获困难,降低株高可以使油菜抗倒伏,矮秆基因一直以来被用作控制株高,因而矮秆基因的定位和分子机理的研究对提高油菜抗倒伏性和油菜高产有着重要的意义。本研究在本实验室前期SNP标记分析基础上,以两个BC1F2大容量家系群体和一个BC1F2:3大容量家系群体为材料,开发标记,构建了分子标记选择体系;采用SSR标记手段,精细定位了控制株高性状的主效基因;并且通过抽样调查方法,研究了高矮秆株型的农艺性状差别。主要研究结果如下:(1)标记的开发:在SNP初定位划定的范围内,用SSR hunter软件查找到101个微卫星位点,并用Primer Premier 5.0软件设计了 92对引物,对这些引物进行多态性筛选,通过BC1F2和BC1F2:3群体验证,PCR反应稳定,结果清晰可读的标记有6对,分别为 BrA09K18、BrA09K20、BrA09K22、BrA09K23、BrA09K25、-BrA09K36。(2)株高性状精细定位:为精细定位M176矮秆突变体株高主效基因,本研究构建了 2个BC1F2和1个BC1F2:3家系群体,标记分析了共计6120个单株。主要结果包括:①BC1F2-1家系群体中,分析了 1866个单株,得到了 25个重组株,上述6个标记与矮秆位点的重组率为0.00%-0.487%;②BC1F2-2家系群体中,分析了 1712个单株,得到了 32个重组株,6个标记与矮秆位点的重组率分别为0.00%-0.829%;③BC1F2:3家系群体中,分析了 2542个单株,得到了 32个重组株,6个标记与矮秆位点重组率为0.00%-0.536%。④三个家系群体重组率分析结果具有一致性,并且对重组株的重组位置进行了分析,这些分析结果可以归纳出一个结论,即矮秆基因定位在标记BrA09K23和BrA09K36之间,标记BrA09K25与株高表型共分离。(3)分离世代中高矮秆表型植株的农艺性状比较研究:利用抽样调查方法,考察了BC1F2家系群体中高矮秆个体的主要农艺性状。结果表明,BC1F2-1家系群体中,矮秆和高秆个体的平均株高分别为101.9±11.2 cm和150.1 ±8.1 cm,差异极显著;矮秆和高秆个体的分枝部位平均数分别为10.0±3.1 cm和52.3±7.9 cm,差异极显著;矮秆和高秆个体的一次分枝数平均分别为10.8±2.2个/株和9.4±2.3个/株;矮秆和高秆个体的千粒重分别为3.5±0.3 g和3.7±0.5 g,差异显著;高矮秆个体主花序长、全株角果数、单株产量差异不显著。BC1F2-2家系群体中,矮秆和高秆个体的农艺性状差异的结论与由BC1F2-1家系群体得出的结论一致。进一步,调查和比较了 BC1F2:3-1家系群体中的矮秆和高秆个体的农艺性状,所得结论也是一致的。这些结果,综合说明矮秆位点的存在,导致株高和分枝部位降低,千粒重有所下降,矮秆还使得茎粗有所增加,分枝数有所增加,但是对单株角果数、单株产量没有显著影响,因此可以认为,该矮秆材料的遗传应用能够增强抗倒伏力性,同时能够增强高产育种潜力。
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