【摘 要】
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目的:通过UVB照射HaCaT细胞建立UVB辐射细胞衰老模型。使用水母雪莲多糖进行药物干预,观察UVB对HaCaT细胞衰老模型的影响;检测ERK1/2及AQP-3关键分子水平变化,阐明水母雪莲多糖减轻皮肤光老化维护皮肤屏障的作用分子机制。方法:体外培养技术培育HaCaT细胞,将目标细胞接种于含有爬片的24孔板内,随机分为四组每组3个孔:Normal组、UVB组、Low-SMMP组、High-SMM
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目的:通过UVB照射HaCaT细胞建立UVB辐射细胞衰老模型。使用水母雪莲多糖进行药物干预,观察UVB对HaCaT细胞衰老模型的影响;检测ERK1/2及AQP-3关键分子水平变化,阐明水母雪莲多糖减轻皮肤光老化维护皮肤屏障的作用分子机制。方法:体外培养技术培育HaCaT细胞,将目标细胞接种于含有爬片的24孔板内,随机分为四组每组3个孔:Normal组、UVB组、Low-SMMP组、High-SMMP组。UVB辐射1h建立细胞衰老模型,药物组使用水母雪莲多糖进行干预,随后四组继续培养18h。Annexin V-FITC/PI检测盒检测各组细胞的凋亡及坏死情况;使用细胞免疫组化法检测水母雪莲多糖对光老化HaCaT细胞中ERK1/2及AQP-3表达量的影响。结果:Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡及坏死显示:与Normal组相比UVB组细胞凋亡及坏死明显升高(P<0.05),提示UVB辐射能加速细胞的凋亡使细胞发生坏死,同时表示成功建立细胞衰老模型;Low-SMMP组与UVB组相比细胞凋亡下降(P<0.05),High-SMMP组与UVB组相比细胞凋亡明显下降(P<0.05),说明水母雪莲多糖对降低细胞凋亡及坏死有显著意义。免疫组化结果表示:UVB组ERK1/2的阳性细胞表达比率高于Normal组(P<0.05);Low-SMMP组ERK1/2的阳性细胞表达比率较UVB组低(P<0.05);High-SMMP组ERK1/2的阳性细胞表达比率低于UVB组(P<0.05);High-SMMP组ERK1/2的阳性细胞表达比率低于Low-SMMP组(P<0.05)。UVB组AQP-3的阳性细胞表达比率低于Normal组(P<0.05);Low-SMMP组AQP-3的阳性细胞表达比率较UVB组高(P<0.05);High-SMMP组AQP-3的阳性细胞表达比率高于UVB组(P<0.05);High-SMMP组AQP-3阳性细胞表达比率高于Low-SMMP组(P<0.05)。结论:水母雪莲多糖对UVB导致的光老化HaCaT细胞的损伤修复具有一定的作用。
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