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在肝组织存在纤维化甚至肝硬化的病理改变基础上,各种致病因子的打击更容易造成严重的肝功能衰竭。终末期肝功能衰竭,临床治疗效果差,给人民健康及医疗财政带来了严峻的考验。众多研究表明肝纤维化形成机制复杂,但具有可逆性。近年来研究发现MicroRNA在调控肝纤维化形成过程中发挥着重要的作用,有研究表明促肝纤维化发展的MicroRNA,其抑制剂能有效的逆转肝纤维化。因此有关肝纤维化的MicroRNA研究可能为临床治疗肝纤维化带来新的突破。第一部分构建大鼠免疫性肝纤维化模型目的：明确是否成功构建大鼠免疫性肝纤维化模型。方法：将26只雄性Wistar大鼠随机分为两组(A、B),A组10只,B组16只。A组为正常对照组,生理盐水腹腔注射(0.5ml/只,2次/周)连续12周；B组为肝纤维化模型组,其中随机选取3只为B1组,腹腔注射猪血清0.5ml/只/次,2次/周,共4周；继续随机抽选3只为B2组,腹腔注射猪血清0.5ml/只/次,2次/周,共8周；余下10只为B3组,腹腔注射猪血清0.5ml/只/次,2次/周,共12周。B1、B2组实验动物分别在第4周末及第8周末处死,留取肝组织进行HE染色、Masson染色,余下全部实验动物在第12周末次给药次日处死,留取肝组织进行HE及Masson染色,依据肝纤维化病理分期方案对大鼠肝纤维化程度进行评分,对胶原纤维面积实行半定量分析。结果：1.HE及Masson染色图示：肝纤维化模型B1组的肝组织形态学改变不明显；B2组肝细胞存在肿胀变性,肝索结构排列较紊乱,结缔组织有增生,纤细的纤维间隔形成,但是未见假小叶；B3组肝小叶结构紊乱,肝索排列不规则,肝窦扭曲,结缔组织明显增生,纤维间隔形成；2.肝纤维化模型B3组肝纤维化程度及胶原纤维面积较正常A组明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论：通过连续12周向Wistar大鼠腹腔注射猪血清可成功构建大鼠免疫性肝纤维化模型。第二部分分析大鼠肝纤维化组织与正常肝组织中MicroRNA的表达差异目的：探索大鼠肝纤维化组织与正常肝组织中MicroRNA的表达差异。方法：在A组与B3组中分别选取3份肝组织标本,用trizol保存送至深圳华大基因进行RNA提取及MicroRNA高通量测序技术检测,然后分析其表达谱差异,再运用qPCR技术进行结果验证。结果：与大鼠正常肝组织相比,在猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化组织中总共有9种MicroRNA发生了变化,其中MicroRNA-1、 MicroRNA-30b-5p、MicroRNA-144、MicroRNA-451MicroRNA-674-3p表达下调,而MicroRNA-27a、MicroRNA-138、 MicroRNA-146b、MicroRNA-342-5p则表达上调。结论：在猪血清诱导的大鼠免疫性肝纤维化组织中MicroRNA的表达谱较正常大鼠肝组织发生了变化,这些具有显著差异的MicroRNA可能与肝纤维化的发生相关。第三部分研究MicroRNA-138与肝纤维化细胞因子表达的相关性目的：验证MicroRNA-138与肝纤维化的发生存在相关。方法：运用qPCR技术检测A组及B3组(各10只,共20只)全部大鼠肝组织中MicroRNA-138的水平,并同时检测TGF-β、CoL-1、 TIMP-1、CTGF的表达。最后运用spss软件统计分析MicroRNA-138水平与TGF-β、CoL-1、TIMP-1、CTGF表达的相关性。结果：1.qPCR技术检测显示MicroRNA-138、TGF-β、CoL-1、 TIMP-1、CTGF在大鼠肝纤维化组织中的表达水平明显高于正常肝组织,差异具有统计学意义(P<0.05)；2.统计学分析MicroRNA-138与TGF-β、CoL-1、TIMP-1及CTGF的相关系数分别为0.818、0.913、0.87和0.82,显著性均为p=0.000<0.01,均有统计学意义。结论：MicroRNA-138与猪血清诱导大鼠免疫性肝纤维化的发生可能相关。