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目的调查医院内感染铜绿假单胞菌的耐药现状,并确定耐药菌株产超广谱β-内酰胺酶种类。方法采集临床标本,常规分离培养,采用Phoenix-100系统进行菌种鉴定,根据NCCIS标准通过纸片琼脂扩散法进行药敏试验;疑似产超广谱β-内酰胺酶细菌采用纸片扩散法ESBLs检测试验初步确证铜绿假单胞菌产超广谱β-内酰胺酶,提取细菌质粒DNA和染色体DNA,PCR试验检测ESBLs基因种类。结果临床标本分离到64株铜绿假单胞菌,64株铜绿假单胞菌对临床常用抗生素药敏试验结果显示对青霉素类、第一、二代头孢菌素类抗生素、头霉素类抗生素头孢西丁及复方磺胺的耐药率均较高,达90%以上,对第三代头孢菌素耐药率在20%—50%之间;对碳青酶烯类抗生素亚胺培南耐药率为15.6%;对酶抑制剂复合制剂替卡西林/克拉维酸耐药率为20.3%;对氨基糖苷类抗生素阿米卡星及喹诺酮类抗生素环丙沙星的耐药率分别为32.8%和29.7%。纸片扩散法ESBLs检测试验确证有27株铜绿假单胞菌产超广谱β-内酰胺酶,比较产ESBLs和非产ESBLs菌株耐药性,产ESBLs菌株对哌拉西林、头孢哌酮、头孢曲松、头孢他啶及氨曲南的耐药率明显高于非产ESBLs菌株(P＜0.05)。PCR试验检测ESBLs基因类型,20株铜绿假单胞菌质粒DNA和染色体DNA中均有TEM型基因;有4株铜绿假单胞菌质粒DNA中检测到OXA-10型基因,有2株细菌染色体DNA存在OXA-10型基因;其中有1株细菌的质粒DNA中同时检测到了TEM型基因和OXA-10型基因。结论本院医院内感染铜绿假单胞菌对临床常用抗生素耐药性和全国其他地区有差别:本院医院内感染铜绿假单胞菌产ESBLs率较高,检测了TEM型酶和OXA-10型酶,以TEM型酶较多;铜绿假单胞菌编码ESBLs基因多位于质粒DNA上,同时也存在于染色体DNA上;铜绿假单胞菌耐药性复杂多样,对第三代头孢菌素抗生素耐药机制主要以产ESBLs为主。图[11]表[7]参[54]