自组装法制备丝素蛋白基纳米微球及其药物释放性能研究

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近年来,由于丝素蛋白(SF)材料良好的生物相容性、生物降解性,被广泛的应用在生物医药领域。本论文通过简单易操作的自组装法,制备出疏水性药物利福平(RIF)负载的SF纳米微球,研究了不同SF溶液浓度及药物RIF的添加量对SF纳米微球的形貌、结构、结晶性能及药物释放性能的影响;采用自组装法制备出聚乙二醇改性的聚乳酸/丝素蛋白(PLA-PEG/SF)纳米微球,研究了改变PLA-PEG的添加量,对PLA-PEG/SF纳米微球形貌、结构、结晶性能、热力学性能,以及罗丹明B(RHB)负载PLA-PEG/SF纳米微球药物释放性能的影响;采用自组装法制备出海藻酸钠/丝素蛋白(SA/SF)纳米微球,研究了SA添加量对SA/SF纳米微球形貌、结构、结晶性能、热力学性能,以及阿霉素(DOX)负载SA/SF纳米微球药物释放性能的影响。论文的主要研究内容如下:(1)利福平负载丝素蛋白纳米微球的制备及药物释放性能通过自组装法制备了RIF负载的SF纳米微球,采用SEM、XRD、FT-IR和马尔文粒径分析仪等,考察了RIF的添加量和SF溶液浓度对RIF负载SF纳米微球形貌、构象、粒径、结晶性能的影响。用紫外可见分光光度计(UV)探究RIF负载SF纳米微球的包封率(EE)、载药率(LC)及药物缓释性能。结果表明:通过改变SF溶液溶度和药物RIF的添加量,可有效调控RIF负载SF纳米微球的平均粒径尺寸分布在123-245 nm;增加药物利福平的添加量,RIF负载SF纳米微球的平均粒径逐渐减小;增大丝素蛋白溶液的浓度,RIF负载SF纳米微球的平均粒径逐渐增大;同时还可以对其载药量及包封率进行调控,增加药物RIF添加量和SF溶液的浓度,其载药量和包封率都逐渐增加,RIF负载SF纳米微球的载药量最高达3.13%、包封率最高达37.61%;增加SF溶液浓度及药物RIF添加量,能有效的降低药物RIF在PBS缓冲溶液中释放速率,延长了释放周期。(2)聚乙二醇改性的聚乳酸/丝素蛋白纳米微球的制备及药物释放性能引入亲水性的PEG接枝到PLA上,来改善PLA的疏水性,制得PLA-PEG。将PLA-PEG溶于N,N二甲基甲酰胺(DMF)中,制得的PLA-PEG/DMF溶液加入到SF水溶液中,通过自组装法成功制备出PLA-PEG/SF纳米微球。探究了PLA-PEG的加入量对PLA-PEG/SF纳米微球的形貌、结构、粒径、热稳定性和结晶性能的影响。并以罗丹明B(RHB)作为亲水性的阳离子药物模型,制备出RHB负载的PLA-PEG/SF纳米微球。通过改变PLA-PEG的添加量,探讨了其对RHB负载PLA-PEG/SF纳米微球的包封率(EE)、载药量(LC)和体外释放性能的影响。结果表明:改变PLA-PEG的添加量,可有效调控PLA-PEG/SF纳米微球的平均粒径在388-487 nm;增加PLA-PEG的添加量,PLA-PEG/SF纳米微球的平均粒径逐渐减小;而且PLA-PEG的加入提高了SF纳米微球的热稳定性,并随着PLA-PEG添加量的增多,PLA-PEG/SF纳米微球热稳定性逐渐升高;同时还可以对其载药量及包封率进行调控,随着PLA-PEG添加量的增加,其载药量和包封率逐渐增加,RHB负载PLA-PEG/SF纳米微球的载药量最高达7.38%、包封率最高达85.02%;增加PLA-PEG的添加量,RHB的体外释放率逐渐降低,延长药物释放周期。(3)海藻酸钠/丝素蛋白纳米微球的制备及药物释放性能利用海藻酸钠良好的溶液稳定性,引入到丝素蛋白材料中,通过氢键相互作用自组装形成SA/SF纳米微球,来改善SF纳米微球的分散性。通过调节SA的添加量,探究SA/SF纳米微球的形貌、结构、粒径分布及溶液稳定性。以阿霉素(DOX)作为亲水性药物,制备出DOX负载的SA/SF纳米微球,探究了SA添加量的不同对载药纳米微球的包封率(EE)、载药量(LC)及体外释放性能的影响。结果表明:通过改变SA的添加量,可有效调控SA/SF纳米微球的平均粒径尺寸分布在502-667 nm;增加SA的添加量,RIF负载SF纳米微球的平均粒径逐渐减小;而且SA的加入,能够提高SF纳米微球的热稳定性,并随着SA添加量的增多,SA/SF纳米微球热稳定性逐渐升高;SA的加入能有效的改善SF纳米微球的分散性,随着SA添加量的增多,分散性逐渐变好;同时还可以对其载药量及包封率进行调控,随着SA添加量的增加,其载药率和包封率逐渐增加,DOX负载SA/SF纳米微球的载药量最高达5.34%、包封率最高达84.83%;同时,随着SA添加量的增加,能有效的降低药物DOX在PBS缓冲溶液中释放速率,延长了释放周期。
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