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目的：microRNA是大约一半人类基因的关键转录调节因子，它们参与疾病的病理生理学，并具有疾病治疗的新潜力。以往的研究已经证明，许多microRNA，例如miR-140，miR-29b，miR-483-5p和miR-218等，在软骨特异性组分软骨的形成、增殖、分化、合成和降解过程中起关键作用。本研究旨在探讨microRAN-199a-5p在机械造模方法诱导的骨关节炎（Osteoarthritis，OA）模型大鼠和单碘乙酸（Monoiodoaceticacid，MIA）诱导的OA模型大鼠中的治疗效果；我们还旨在探讨这种microRAN在人SW1353软骨细胞中的表达量。
方法：实验一：体重200g左右的雄性SD大鼠18只，随机分为3组，每组6只，即对照组：不作特殊处理；机械模型组：切除右膝前交叉韧带和内侧半月板；治疗组：在模型组的基础上，右膝关节腔内注射100μl的microRAN-199a-5pagomir。在关节腔注射治疗4周和8周后，从腹主动脉处抽取5ml血夜,然后处死大鼠取关节标本，分别对大鼠关节标本进行形态学、组织学、免疫荧光组化评估以及血清NO测定，并采用Pelletier评分和改良的Mankins评分分别对每个组进行统计学处理。实验二：体重200g左右的雄性SD大鼠18只，随机分为3组，每组6只，即对照组：右膝关节腔内注射100μl的生理盐水；MIA模型组：右膝关节腔内注射100μl的MIA；治疗组：在模型组的基础上，右膝关节腔内注射100μl的microRAN-199a-5pagomir。在关节腔注射治疗1周和2周后，从腹主动脉处抽取5ml血夜,然后处死大鼠取关节标本，分别对大鼠关节标本进行形态学、组织学、免疫荧光组化评估以及血清NO测定，并采用改良的Mankins评分分别对每个组进行统计学处理。实验三：用IL-1β诱导人SW1353软骨细胞，构建OA细胞模型，设置对照组，用实时定量聚合酶链反应（qPCR）方法检测microRAN-199a-5p，以及OA相关基因MMP3和MMP13的表达变化。
结果：实验一：在关节腔注射治疗完成后分别进行形态学观察，对照组示：膝关节的股骨和胫骨软骨面较完整且有光泽，软骨面光滑略透明；机械模型组：造模4周后见膝关节软骨表面出现小的缺损，软骨面色泽灰暗，软骨厚度变薄；造模8周后见膝关节软骨表明破坏明显，软骨厚度明显变薄；治疗组：治疗4周后见关节软骨表面相对较平整，关节面尚光滑；治疗8周后关节软骨表面完整度尚可，关节面光泽度慢慢恢复。与机械模型组相比，治疗组的Pelletier评分显著降低（P＜0.05）。组织学染色结果表明：对照组软骨基质染色较均匀，软骨面无缺损，软骨细胞排列较整齐，潮线清楚。机械模型组：造模4周后见关节软骨表面出现小的缺损，软骨层厚度变薄，细胞数目变少，潮线模糊，表层软骨基质番红O以及甲苯胺蓝着色变浅；造模8周后见软骨表面较粗糙，软骨层破坏明显，潮线消失，番红O以及甲苯胺蓝着色显著变浅。治疗组：造模4周后见软骨层尚平整，潮线可见，染色大致正常；造模8周后见软骨层有小的缺损，潮线模糊，染色轻度变浅。与机械模型组相比，治疗组改良的Mankins评分显著降低（P＜0.01）。免疫荧光组化结果显示：与对照组相比，机械模型组COL-2表达水平降低，MMP-13、RUNX-2表达水平增加，而治疗组则恰恰相反，COL-2表达水平增加，MMP-13、RUNX-2表达水平降低。血清NO测定值：造模4周和8周后，治疗组均较机械模型组降低，且治疗组均高于对照组。实验二：在关节腔注射治疗1周和2周后分别进行形态学观察，对照组示膝关节的股骨和胫骨软骨面较平整且光滑，软骨表面有光泽且略透明；MIA模型组在造模1周后，膝关节软骨表面出现小的缺损，软骨面失去正常的光泽度，软骨的厚度变薄；造模2周后，软骨表面缺损严重，粗糙不平，软骨厚度明显变薄；治疗组在关节腔注射治疗1周后，软骨面尚平整，光泽度欠佳，治疗2周后，软骨厚度较对照组略微变薄，软骨面缺损较小，表面光泽度尚在。与MIA模型组相比，治疗组的Pelletier评分显著降低（P＜0.05）。组织学染色结果表明：对照组软骨基质染色较均匀，软骨表层未见缺损，潮线较完整。MIA模型组：造模1周后见关节软骨表面出现缺损，软骨厚度变薄，潮线模糊，表层软骨基质番红O以及甲苯胺蓝着色变浅；造模2周后见软骨表面粗糙，软骨层破坏明显，潮线消失，染色显著变浅。治疗组：造模1周后见软骨层尚平整，潮线依然可见，染色大致正常；造模2周后见软骨层有小的缺损，软骨细胞数目轻度变少，潮线模糊，染色轻度变浅。与MIA模型组相比，治疗组的改良Mankins评分显著降低（P＜0.01）。血清NO测定值：造模1周和2周后，治疗组均较MIA模型组降低，且治疗2周组略低于治疗1周组。实验三：与对照组相比，OA细胞模型组miRNA-199a-5p的表达量明显降低，MMP3和MMP-13的表达量显著性升高。
结论：成功构建了OA动物模型和细胞模型，通过关节腔内注射miRNA-199a-5pagomir治疗OA大鼠，使OA大鼠形态学、组织学评分有了明显改善，OA相关基因表达也有了显著性变化；在OA细胞模型中，OA相关基因表达变化显著，miRNA-199a-5p表达量显著性降低。因此，miRNA-199a-5p可以延缓关节软骨的退变进程，对OA有潜在的治疗作用，为OA的治疗提供了一种新的思路。
方法：实验一：体重200g左右的雄性SD大鼠18只，随机分为3组，每组6只，即对照组：不作特殊处理；机械模型组：切除右膝前交叉韧带和内侧半月板；治疗组：在模型组的基础上，右膝关节腔内注射100μl的microRAN-199a-5pagomir。在关节腔注射治疗4周和8周后，从腹主动脉处抽取5ml血夜,然后处死大鼠取关节标本，分别对大鼠关节标本进行形态学、组织学、免疫荧光组化评估以及血清NO测定，并采用Pelletier评分和改良的Mankins评分分别对每个组进行统计学处理。实验二：体重200g左右的雄性SD大鼠18只，随机分为3组，每组6只，即对照组：右膝关节腔内注射100μl的生理盐水；MIA模型组：右膝关节腔内注射100μl的MIA；治疗组：在模型组的基础上，右膝关节腔内注射100μl的microRAN-199a-5pagomir。在关节腔注射治疗1周和2周后，从腹主动脉处抽取5ml血夜,然后处死大鼠取关节标本，分别对大鼠关节标本进行形态学、组织学、免疫荧光组化评估以及血清NO测定，并采用改良的Mankins评分分别对每个组进行统计学处理。实验三：用IL-1β诱导人SW1353软骨细胞，构建OA细胞模型，设置对照组，用实时定量聚合酶链反应（qPCR）方法检测microRAN-199a-5p，以及OA相关基因MMP3和MMP13的表达变化。
结果：实验一：在关节腔注射治疗完成后分别进行形态学观察，对照组示：膝关节的股骨和胫骨软骨面较完整且有光泽，软骨面光滑略透明；机械模型组：造模4周后见膝关节软骨表面出现小的缺损，软骨面色泽灰暗，软骨厚度变薄；造模8周后见膝关节软骨表明破坏明显，软骨厚度明显变薄；治疗组：治疗4周后见关节软骨表面相对较平整，关节面尚光滑；治疗8周后关节软骨表面完整度尚可，关节面光泽度慢慢恢复。与机械模型组相比，治疗组的Pelletier评分显著降低（P＜0.05）。组织学染色结果表明：对照组软骨基质染色较均匀，软骨面无缺损，软骨细胞排列较整齐，潮线清楚。机械模型组：造模4周后见关节软骨表面出现小的缺损，软骨层厚度变薄，细胞数目变少，潮线模糊，表层软骨基质番红O以及甲苯胺蓝着色变浅；造模8周后见软骨表面较粗糙，软骨层破坏明显，潮线消失，番红O以及甲苯胺蓝着色显著变浅。治疗组：造模4周后见软骨层尚平整，潮线可见，染色大致正常；造模8周后见软骨层有小的缺损，潮线模糊，染色轻度变浅。与机械模型组相比，治疗组改良的Mankins评分显著降低（P＜0.01）。免疫荧光组化结果显示：与对照组相比，机械模型组COL-2表达水平降低，MMP-13、RUNX-2表达水平增加，而治疗组则恰恰相反，COL-2表达水平增加，MMP-13、RUNX-2表达水平降低。血清NO测定值：造模4周和8周后，治疗组均较机械模型组降低，且治疗组均高于对照组。实验二：在关节腔注射治疗1周和2周后分别进行形态学观察，对照组示膝关节的股骨和胫骨软骨面较平整且光滑，软骨表面有光泽且略透明；MIA模型组在造模1周后，膝关节软骨表面出现小的缺损，软骨面失去正常的光泽度，软骨的厚度变薄；造模2周后，软骨表面缺损严重，粗糙不平，软骨厚度明显变薄；治疗组在关节腔注射治疗1周后，软骨面尚平整，光泽度欠佳，治疗2周后，软骨厚度较对照组略微变薄，软骨面缺损较小，表面光泽度尚在。与MIA模型组相比，治疗组的Pelletier评分显著降低（P＜0.05）。组织学染色结果表明：对照组软骨基质染色较均匀，软骨表层未见缺损，潮线较完整。MIA模型组：造模1周后见关节软骨表面出现缺损，软骨厚度变薄，潮线模糊，表层软骨基质番红O以及甲苯胺蓝着色变浅；造模2周后见软骨表面粗糙，软骨层破坏明显，潮线消失，染色显著变浅。治疗组：造模1周后见软骨层尚平整，潮线依然可见，染色大致正常；造模2周后见软骨层有小的缺损，软骨细胞数目轻度变少，潮线模糊，染色轻度变浅。与MIA模型组相比，治疗组的改良Mankins评分显著降低（P＜0.01）。血清NO测定值：造模1周和2周后，治疗组均较MIA模型组降低，且治疗2周组略低于治疗1周组。实验三：与对照组相比，OA细胞模型组miRNA-199a-5p的表达量明显降低，MMP3和MMP-13的表达量显著性升高。
结论：成功构建了OA动物模型和细胞模型，通过关节腔内注射miRNA-199a-5pagomir治疗OA大鼠，使OA大鼠形态学、组织学评分有了明显改善，OA相关基因表达也有了显著性变化；在OA细胞模型中，OA相关基因表达变化显著，miRNA-199a-5p表达量显著性降低。因此，miRNA-199a-5p可以延缓关节软骨的退变进程，对OA有潜在的治疗作用，为OA的治疗提供了一种新的思路。