【摘 要】
:
番木瓜(Carica papaya L.)是一种具有重要经济价值的热带果树,存在三种不同的性别类型,分别是雄性、雌性和雌雄同花。其性别是由性染色体决定。本研究前期用钴60-γ射线对番木瓜进行诱变,筛选到一个由雄性变为雌性的突变体dmf2。通过全基因组测序,发现在雄性Y染色体的性别决定区域(Male-specific region of Y chromosome,MSY)有 1 Mb 片段的缺失,推
论文部分内容阅读
番木瓜(Carica papaya L.)是一种具有重要经济价值的热带果树,存在三种不同的性别类型,分别是雄性、雌性和雌雄同花。其性别是由性染色体决定。本研究前期用钴60-γ射线对番木瓜进行诱变,筛选到一个由雄性变为雌性的突变体dmf2。通过全基因组测序,发现在雄性Y染色体的性别决定区域(Male-specific region of Y chromosome,MSY)有 1 Mb 片段的缺失,推测dmf2的性别转变是由于这1 Mb的缺失片段造成的。根据基因组注释,1 Mb缺失片段中存在数个编码基因,CpMYB24是其中一个转录因子类的功能基因。本研究以番木瓜CpMYB24基因为研究对象,通过CpMYB24的时空表达模式分析、拟南芥突变体回复实验、酵母双杂交和BiFC蛋白互作验证、启动子瞬时表达分析等实验揭示番木瓜CpMYB24在番木瓜中的表达和功能,并初步分析CpMYB24参与雄蕊发育网络的可能分子机理。后期试图通过番木瓜CpMYB24超表达及敲除基因实验验证CpMYB24是否参与番木瓜性别分化。1、通过RNA-Seq数据分析及定量PCR结果显示,CpMYB24在雌性株的花中不表达,而在雄性和雌雄同花植株的花中的表达水平较高。且发育的早期阶段CpMYB24在雄性和两性中表达较低,当花发育到7 mm后,CpMYB24在雄性和两性中表达明显增加。推测CpMYB24参与番木瓜雄性花、双性花发育。2、CpMYB24Y的异源表达可以部分恢复拟南芥myb21myb24双突变体雄性不育的表型,说明CpMYB24与拟南芥中AtMYB24功能相似,可能是控制雄蕊发育过程的关键基因。3、在拟南芥中,MYB24可以与MYC相互作用,共同调节雄蕊发育。本研究克隆获得番木瓜4个MYC家族成员CpMYC1、CpMYC2、CpMYC3和CpMYC4。通过酵母双杂和双分子荧光互补实验证明了蛋白CpMYB24和CpMYC3在体内外有直接相互作用。推测在番木瓜中蛋白MYB24和MYC相互作用,从而调控番木瓜雄蕊发育。4、为了寻找与CpMYB24互作的蛋白,本研究利用SMART技术构建了番木瓜雄花的酵母cDNA双杂交文库,用于筛选与CpMYB24可能的互作蛋白。结果表明该文库有较高的质量,可用于进一步筛选工作。5、利用预测软件对CpMYB24Y启动子区域的顺式元件进行预测,克隆5个不同长度的启动子缺失片段转化番木瓜,观察愈伤GUS的瞬时表达。结果显示CpMYB24Y起始密码子前2017 bp的片段能启动GUS的表达,说明调控启动活性和效率的顺式元件主要集中在启动子ATG前2017 bp,同时在ATG前217 bp的启动子已具有启动活性。6、构建CpMYB24Y CRISPR敲除载体转化雌雄同花番木瓜的愈伤。同时构建番木瓜CpMYB24Y基因过表达载体,转化雌性番木瓜愈伤组织。目前已经筛选到超表达CpMYB24Y的雌性小苗,PCR检测阳性。为验证CpMYB24在番木瓜体内的功能和进一步探究番木瓜性别决定分子机理打下坚实的基础。
其他文献
科学的经营管理技术是红松果林产业发展的重要环节之一,是利用有限的林地资源,最大限度提升果实产量的有效手段。该文论述了红松果林经营管理技术主要环节和内容,包括林地管理、树体管理、密度控制、花粉管理、复合经营、病虫害防治等,分析了红松果林经营管理中存在的问题,并提出了解决对策。
The Great Silk Road is a trade route linking the East and West,which gave impetus to the development of ancient society,and Kazakhstan is the heart of the trade route.At the initial stage,intensive tr
机械式自动变速器(AMT)是在手动变速器上安装离合器和选换档机构和相应的控制器而来。因其结构简单、传动效率高、燃油经济性好及成本低的优势而广泛应用到了新能源及传统车上。离合器是发动机与变速箱之间扭矩传递的桥梁,其完全通过摩擦副的形式传递扭矩,利用离合器的接合与分离,在起步时可以避免发动机转速急剧下降,有利于发动机形成稳定的润滑状态,减轻摩擦副的摩擦磨损,在换档时能够大大降低对变速箱齿轮材料的韧性和
在“植物细胞工程的应用”一节的教学实践中,利用本土资源,厚植乡土情怀,以“为枇杷果农增收入”为情境主题,设置“枇杷优良品种培育”“枇杷优良品种繁殖”和“枇杷深加工”等3个子情境,引导学生在真实情境中归纳植物细胞工程在生产实践中的具体应用,提升科学实践意识。
热带和亚热带玉米种质具有丰富的遗传多样性并携带许多优良性状。但是,光照和温度的差异严重限制了热带和亚热带玉米的地理分布以及在温带地区的广泛种植。植物为了适应不同的地理分布已进化出了多个适应机制,其中生物钟是最为重要的适应机制。植物利用生物钟来感知外界环境因子,如光照、温度等的变化,进而通过产生不同的输出节律来调控植物对不同环境的适应,以确保植物正常生长和繁殖。因此,研究玉米生物钟组分基因的功能,生
随着我国经济的迅速发展,金融科技不断创新,线上支付作为一种新型支付方式,逐渐走进人们的视野,并受到越来越多人的青睐。由于线上支付具有轻松交易、方便快捷等特点,近年来在我国的发展突飞猛进。但是随着线上支付结算市场逐渐被民营银行所占据,国有商业银行支付结算的市场份额不断减少,对金融科技领域的监管产生了影响。在此背景下,我国国有商业银行不断在线上支付领域积极探索新机遇,虽然取得了一定的进步,但是目前存在
改革开放政策施行的二三十年间,我国取得了巨大的经济发展成就。经济发展带动了城市化发展加速,城市的数量与规模快速增长,城市人口也显著增加。2011年,我国城市人口首次超过农村人口(Pan,2010)。根据国家新型城镇化规划(2014-2020),截止2014年,我国已有7个人口超过一千万的城市;16个人口超过五百万的城市;142个人口超过一百万的城市。与此同时,城乡差异也在逐年增大,具体表现为城乡居