红三叶联合环磷酰胺对宫颈癌U14细胞作用的实验研究

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目的:  实验一:观察昆明小鼠的红三叶最大耐受量及急性毒性反应。  实验二:观察红三叶联合环磷酰胺对小鼠宫颈癌U14的抑制作用。  方法:  实验一:选取20只昆明小鼠,雌雄各半,空腹12小时后,每只小鼠1次灌胃0.8ml,含36mg红三叶,相当于以1800mg/kg作1次最大耐受量试验。观察6天,第7天处死小鼠,观察各脏器器官变化。  实验二:将U14细胞瘤液分别接种于70只雌性昆明小鼠右前肢腋下,随机分为7组,分别进行环磷酰胺、红三叶低、中、高剂量、红三叶低剂量+环磷酰胺和红三叶中剂量+环磷酰胺治疗以及对照观察。采用灌胃及腹腔注射方法给药,连续给药6天,每天观察各组小鼠饮食、精神、活动情况及瘤体生长情况,第10天称取小鼠重量,脱椎处死,解剖瘤鼠称取瘤重、胸腺及脾脏的重量,计算肿瘤体积、抑瘤率、两药相互作用系数(CDI和Q值)以及胸腺和脾脏指数,光镜下观察肿瘤组织病理学改变,TUNEL实验检测细胞凋亡情况。  结果:  实验一:红三叶以1800mg/kg为昆明小鼠最大耐受量灌胃,实验小鼠全部存活,无中毒症状,解剖观察各脏器、器官无明显异常。  实验二:对照组小鼠肿瘤体积大,结节最明显,生长速度也最快。红三叶高剂量组、联合用药组对宫颈癌Ul4荷瘤小鼠的抑瘤率均达到了有效标准(抑瘤率>30%),具有抑瘤作用,提示单用红三叶的最低药物剂量不能小于400mg/Kg。胸腺和脾脏指数是随着红三叶剂量的增加而增加,红三叶高剂量组与环磷酰胺组比较有统计学意义。光镜下显示,对照组具有明显的癌细胞特征,在红三叶各组、环磷酰胺及联合组均可见肿瘤细胞的退形性变和坏死,以联合治疗组明显。TUNEL检测提示红三叶各组对宫颈癌U14细胞的凋亡作用,随着药物剂量的增加而明显,联合组的凋亡作用优于环磷酰胺组,两药联合具有协同作用。  结论:  实验一:昆明小鼠的红三叶最大耐受量为1800mg/kg。本实验单用红三叶的最高剂量400mg/Kg是安全的。  实验二:红三叶对宫颈癌U14荷瘤小鼠肿瘤有抑制作用,以联合实验组最明显。
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