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近年来,由丹参与三七组成的方剂及中成药在心血管疾病临床治疗上得到了广泛应用。丹参酚酸和三七皂苷作为复方丹参方的主要药效物质,其药效作用在整体动物模型上已得到确证,但其配伍机制尚不清楚,是否存在配伍增效作用尚缺乏科学依据。因此,本论文以丹参酚酸和三七皂苷为研究对象,从其抗心肌缺氧作用机制入手,研究了二者配伍对缺氧损伤心肌细胞、内皮细胞的保护作用以及其机制,主要研究内容如下：1.研究了丹参总酚酸和三七总皂苷配伍对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。采用MTT法、Hoechst33342染色、流式细胞术及蛋白质印迹法(western blot)等技术观察了丹参总酚酸和三七总皂苷配伍对H9c2细胞缺氧/复氧损伤的影响。研究发现丹参总酚酸和三七总皂苷配伍可协同保护缺氧/复氧损伤的心肌细胞,减少乳酸脱氢酶释放；且能显著降低细胞凋亡,提高Bcl-2/Bax的比率,抑制凋亡相关蛋白Caspase3的表达。同时,配伍可显著升高细胞内Na+,K+-ATPase, Ca2+,Mg2+-ATPase酶活性,提高胞内能量物质ATP的含量。结果提示,丹参总酚酸和三七总皂苷配伍在抗心肌细胞凋亡和改善能量代谢两方面具有协同作用。2.研究了丹参总酚酸和三七总皂苷配伍对内皮细胞缺氧损伤的保护作用。采用MTT法、Griess法、蛋白质印迹法观察了丹参总酚酸和三七总皂苷配伍对缺氧损伤入脐静脉内皮细胞(HUVEC)的影响。研究发现丹参总酚酸、三七总皂苷及其配伍能够显著保护缺氧损伤的内皮细胞,提高内皮细胞存活率和NO分泌量,增加HIF-1α蛋白表达以及降低p38MAPK磷酸化水平。结果提示丹参总酚酸和三七总皂苷配伍可能通过HIF-1α和MAPK相关信号通路保护内皮细胞,从而减轻缺血性心肌损伤。3.研究了丹酚酸B与人参皂苷Rb1配伍对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用。采用LDH检测、JC-1染色、化学发光法及蛋白质印迹法观察了丹酚酸B和人参皂苷Rb1配伍对乳鼠原代培养心肌细胞(NRC)缺氧/复氧损伤的影响。研究发现丹酚酸B和人参皂苷Rb1配伍可协同保护缺氧/复氧损伤的心肌细胞,减少乳酸脱氢酶的释放。二者配伍可显著升高线粒体膜电位,增加细胞内ATP含量,提高Bcl-2/Bax的比率,抑制凋亡相关蛋白Caspase3的表达,显著抑制AMPKa磷酸化。结果提示丹酚酸B和人参皂苷Rbl配伍可能通过抑制心肌细胞凋亡、维持线粒体功能和改善能量代谢等机制保护心肌细胞。综上所述,丹参酚酸和三七皂苷配伍抗心肌缺氧损伤的潜在作用机制包括抗心肌细胞凋亡、改善能量代谢、保护内皮细胞等,且在多个作用途径上存在协同作用。相关研究结果为深入了解复方丹参方治疗缺血性心脏病的作用机制提供了新的科学依据。