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脊椎动物端脑(大脑)皮质和小脑在控制动物运动方面共同发挥重要的作用。有关端脑和小脑的直接联系一直是人们探索的一个重要的问题。近十几年已有数篇报道在哺乳类动物发现直接的大脑皮质→小脑投射,而有关哺乳类动物小脑→大脑的直接投射几乎没有。对禽类小脑→端脑的直接投射的确认对于证明哺乳类动物小脑→端脑直接投射结构和机能方面的进化历程有重要的理论意义,同时有助于建立以禽类为模型的功能研究体系,加速人们对这一投射功能意义的揭示。为证实家禽小脑-海马结构直接投射通路是否存在,以及这一通路抵达端脑后的确切投射部位。本实验以粤禽黄鸡为研究对象,采用HRP逆行示踪法、溃变电镜顺行示踪法、红藻氨酸电镜法、同位素示踪法对这一问题进行了综合研究,主要研究内容和结果如下:
1.将30%辣根过氧化物酶注射到鸡端脑海马的内侧部,包括旁海马内侧区(APHm),旁海马中间内侧区(APHim)和中间外侧区(APHil),逆行追踪双侧端脑和小脑向海马结构的传入纤维联系,结果在小脑第Ⅰ~Ⅵ和Ⅸ、Ⅹ叶的前半叶皮质中的蒲氏细胞被标记;在端脑,双侧的外侧隔核、同侧和对侧海马结构的APHm均有多量逆标神经元被标记,初步表明禽类海马结构接受小脑、双侧海马结构(hippocampal formation,HF)、隔核的传入投射。
2.制备单电级和双电极,探索出不同电极损毁时的最佳通电电压和最佳通电时间,损毁鸡小脑V叶髓质,动物经7天的存活期后,透射电镜发现在海马APHm有多量的溃变终末和溃变纤维。
3.将红藻氨酸定点注射到鸡小脑V叶皮质,经7天存活期后,蒲氏细胞被选择性损毁,透射电镜观察到端脑海马APHm出现不同程度以及不同数量的溃变终末和溃变纤维。
4.将H3—亮氨酸注射到小脑V叶蒲氏细胞层,小脑外侧核、中脑导水管背侧部和两侧端脑APHm发现银染颗粒。
上述结果表明,禽类小脑向海马结构存在直接的投射,这种投射起始于小脑的蒲氏细胞,终止于端脑旁海马的内侧区;投射方式是交叉投射。