蚁参蠲痹胶囊是颈复康药业集团有限公司独家生产的治疗风湿骨病的主打品种,处方由蚂蚁、丹参、人参等15味中药组成,具有祛风除湿、补肾健脾、活血通络的功效,用于治疗类风湿性关节炎（中医辨证为脾肾两虚、寒湿瘀阻证）,具有显著的临床疗效。蚁参蠲痹胶囊药味较多,所含化学成分复杂,在其现行国家药品标准中,仅规定了蚂蚁、人参、关黄柏、桂枝的鉴别,以及臣药丹参中的丹参酮IIA和丹酚酸B的含量测定方法,基于现行质量标准过于简单,难以对产品的质量进行全面的评价和控制。因此,本研究在其现有质量控制方法基础上,从指纹图谱、含量测定两个方面对蚁参蠲痹胶囊进行质量标准提升研究,以提升该产品的质量控制方法,更全面、更有效地控制产品质量。目前,蚁参蠲痹胶囊的制剂工艺是以提取浸膏为粘合剂,加入其余五味（蚂蚁、人参、制川乌、蜈蚣、酒乌梢蛇）细粉入药的药材细粉,采用传统的湿法制粒技术进行制粒。由于该制剂药味较多且处方量较大,使得提取浸膏量较大,导致在湿法制粒过程中颗粒烘干受热时间较长,对制剂中含有的热敏性药效成分的损失较大,并且在颗粒干燥过程中易出现结块现象。因此,针对上述问题,本研究在蚁参蠲痹胶囊现有提取工艺的基础上,对浸膏干燥工艺进行优选,拟将浸膏直接干燥为干膏粉,用干法制粒技术代替传统的湿法制粒技术,以减少物料与水和热的接触,避免湿法制粒中出现的易结块以及受热时间较长引起的有效成分破坏的问题,以期提高产品质量。最后,采用提升后的质量标准,对工艺改进前后蚁参蠲痹胶囊进行质量对比与评价。目的:1建立蚁参蠲痹胶囊指纹图谱;建立蚁参蠲痹胶囊中君药蚂蚁中的主要有效成分蚁酸的含量测定方法;建立一测多评法（quantitative analysis of multi-components with a single-marker,QAMS）同时测定蚁参蠲痹胶囊中桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、苍术素、丹参酮ⅡA五种化学成分含量,完善与提升蚁参蠲痹胶囊的质量控制方法。2优选出蚁参蠲痹胶囊浸膏的最佳干燥工艺;确定蚁参蠲痹胶囊最佳干法制粒工艺参数。3采用提升后的质量标准,对工艺改进前后蚁参蠲痹胶囊进行质量对比与评价。方法:1采用双波长法建立蚁参蠲痹胶囊指纹图谱,色谱柱:Agilent 5TC-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相:乙腈-0.02%磷酸溶液（梯度洗脱）,波长:0～75 min,320 nm;75～120 min,270 nm,柱温:20℃。以丹参酮ⅡA为参照峰,测定10批蚁参蠲痹胶囊样品指纹图谱,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012年版）”进行相似度分析,确定共有峰,并对共有峰进行指认及药材归属。采用衍生气相色谱法,样品经水提取后,在浓硫酸的催化作用下蚁酸与乙醇反应生成甲酸乙酯,色谱柱:DM-FFAPS（Dikma,30 m×0.25 mm,0.25μm）,进样口温度:200℃,柱温:40℃,顶空进样,顶空平衡温度:60℃,平衡时间:30 min,进样量为1 m L,载气:氮气,流速为1 m L/min,FID检测器温度250℃。采用QAMS法,色谱柱:Kromasil 100-5-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相:乙腈-0.02%磷酸溶液（梯度洗脱）,流速1.0 m L/min,检测波长270 nm,柱温20℃。以丹参酮ⅡA为内参物,建立桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ι和苍术素的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评;同时采用外标法测定该5种化学成分含量,比较计算值与实测值的差异,验证QAMS法的准确性。2浸膏干燥工艺:在蚁参蠲痹胶囊原有提取工艺的基础上制得浸膏,以干膏性状、干膏粉收率、各指标性成分含量及水分为评价指标,对浸膏干燥方式（鼓风烘箱干燥、减压干燥、喷雾干燥、冷冻干燥）及干燥参数进行优选,确定最佳干燥工艺。干法制粒工艺:以颗粒一次成型率为评价指标,通过单因素结合Box-Behnken响应面试验法,对干法制粒的主要工艺参数轧轮压力、轧轮转速、送料速度进行考察,确定最佳干法制粒工艺参数。3采用提升后的质量标准,从性状、鉴别、检查、指纹图谱及含量测定五个方面对工艺改进前后蚁参蠲痹胶囊进行全面的质量对比。结果:1建立了蚁参蠲痹胶囊HPLC指纹图谱,共标定了35个共有峰,10批样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均大于0.95,通过将对照指纹图谱与对照品色谱图比较,指认出12个成分,并对各共有峰进行了药材归属。建立了蚁参蠲痹胶囊中君药蚂蚁中的主要有效成分蚁酸的含量测定方法,方法精密度、稳定性、重复性均良好,蚁酸在0.257～4.104 mg/m L浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9997）,平均加样回收率103.84%,RSD为1.64%（n=6）。建立了QAMS法同时测定桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、苍术素、丹参酮ⅡA五种化学成分含量方法,所建方法精密度、稳定性、重复性均符合要求,桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、苍术素、丹参酮ⅡA浓度分别在0.68～10.88,2.35～37.66,0.74～11.79,0.77～12.24,2.35～38.00μg/m L范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率96.80%～101.54%,RSD为0.33%～1.31%。建立的相对校正因子重现性良好,采用校正因子计算的含量值与实测值之间无显著差异,相对误差均在±2%以内。2浸膏干燥工艺:最佳干燥方式为冷冻干燥,样品经冷冻干燥后,质地疏松,指标性成分损耗低,干膏粉收率较高,水分较低,故最终选择干燥方式为冷冻干燥。以冻干样品水分为指标,通过优选得出最佳冻干曲线为:预冻温度为-40℃,时间为3 h;温度逐渐升至-30℃,再由-30℃逐渐升至10℃,整个升华干燥过程约35 h;再干燥温度为25℃,时间为6h。干法制粒工艺:干法制粒最佳工艺参数为轧轮压力4.5 MPa,轧轮转速3 rpm,送料速度10 rpm。通过3批干法制粒工艺验证表明,工艺重复性良好,稳定可行,所制得颗粒得率较高,流动性较好,堆密度高。3通过对工艺改进前后蚁参蠲痹胶囊进行质量对比,结果表明,采用两种不同制备工艺制得的产品,在【性状】、【鉴别】及【检查】项下均符合规定;在【指纹图谱】项下,两种制备工艺制得蚁参蠲痹胶囊的HPLC对照指纹图谱共有峰数目一致,相似度为0.992,大于0.990,表明改进后的工艺未对产品的主要化学成分组成产生显著影响;在【含量测定】项下,采用改进后工艺制得蚁参蠲痹胶囊中蚁酸、桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹酚酸B含量均高于原制备工艺,苍术素含量差别不大。结论:1建立了蚁参蠲痹胶囊指纹图谱;建立了蚁参蠲痹胶囊中蚁酸的含量测定方法;建立了QAMS法同时测定桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ι、苍术素和丹参酮ⅡA含量的测定方法,所建方法特征性、精密度、专属性、稳定性和重复性均良好,适用于该产品的质量控制和评价,完善了该产品的质量控制方法。2所优选的蚁参蠲痹胶囊浸膏干燥工艺及干法制粒工艺稳定、可行,适用于蚁参蠲痹胶囊的制备。3改进后的蚁参蠲痹胶囊制备工艺避免了原湿法制粒中出现的易结块现象,制得产品的性状、鉴别及检查均符合规定,在整体上未改变产品的主要化学成分组成,更大程度地保留了有效成分含量,工艺简单易操作,便于自动化,提高了产品质量,因此,改进后的制备工艺更适合蚁参蠲痹胶囊的生产。