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白细胞介素6(IL-6)是一种多功能的细胞因子,在免疫、造血、炎症反应等过程中起到重要作用,它的过量表达与很多疾病有直接联系。本实验用自主研发的多功能光镊平台,在单个活细胞水平上实验研究了IL-6与其受体间的相互作用。
实验设计了阳性组(含IL-6与其受体)和两个对照组(不含IL-6的阴性组和拮抗剂组),结果显示各实验组在160pN/s-4000pN/s的加载率下黏附率有显著区别,阳性组最高,阴性组最低,表明阳性组包含了IL-6与其受体特异性结合的作用的信息。通过对阳性组加载率在160pN/s-800pN/s的断裂力的直方图进行统计分析得到最可几断裂力为6pN-13pN,在此基础上用贝尔模型拟合,计算得到了IL-6与其受体作用的反应柔度(0.92nm)和离解速率常数(8.72s-1)两个重要的动力学参数。实验发现,在加载率160pN/s-800pN/s区域,拮抗剂组与阳性组对比,断裂力直方图拟合曲线在20pN附近有明显凹陷,且凹陷中心随加载率增大而单调移动,推测这是IL-6与其受体高亲和力作用分布区域。此外,本文还针对在活细胞上进行实验细胞膜可能带来的影响以及随着加载率增大力谱呈现出的其他特点进行了探讨。