苹果TPS基因家族成员的克隆及其在‘长富2号’花芽孕育中的作用

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T6P(海藻糖6-磷酸)是植物碳水化合物状态的指示剂,和蔗糖密切相关,可以作为重要的信号分子参与植物成花诱导。TPS基因家族是T6P生物合成途径的重要成员。本文对苹果TPS基因家族成员进行了鉴定,并对其组织特异性表达进行了分析。同时采用蔗糖喷施处理、摘果处理及品种比较,分析MdTPS基因家族成员在不同碳水化合物水平、不同成花情况下的表达模式,以期探究蔗糖及摘果处理对富士成花的影响,揭示MdTPS基因家族成员对富士花芽孕育的生理与分子机制,结果如下:1.本研究在苹果中鉴定出13个TPS基因家族成员,进化树及基因结构分析表明13个TPS成员被分成两类:MdTPS1、MdTPS2、MdTPS9为Class I亚家族,其余为Class II亚家族;I类TPS基因比II类基因有更多数量的外显子和内含子。此外,在富士苹果中克隆得到了3个I类MdTPS基因,即MdTPS1、MdTPS2、MdTPS9。结果表明MdTPS1、MdTPS2基因序列比基因组中短75bp,MdTPS9基因序列比基因组中长114bp。2.MdTPS基因家族在苹果中的表达具有组织特异性,MdTPS1和MdTPS2具有相似的表达模式,在茎中表达最高,花中表达最低,而MdTPS9在花中表达量最高,在短枝顶芽中表达量最低。II类MdTPS基因中,MdTPS3、4、6、7、11在果实中表达量最高,MdTPS5、12、13在花中表达量最高,MdTPS8、10在芽中表达量最高,说明这些基因可能参与不同的器官建成。3.蔗糖处理和摘果处理促进了富士短枝顶芽可溶性糖含量的积累,加速了成花诱导阶段短枝顶芽的生长,提高了富士成花率。此外,MdTPS家族成员能响应蔗糖处理、摘果处理且在易成花品种‘烟富6号’中表达水平更高。MdTPS1、2、4、11与碳水化合物水平及苹果成花诱导密切相关,可能通过响应蔗糖,调控MdCO、MdSPL2等促进下游花分生组织基因MdLFY、MdAP1来参与苹果成花诱导。4.MdTPS家族成员启动子上含有响应激素(IAA、GA、ABA、JA和SA等)和光照的顺式作用元件,说明MdTPS除了响应蔗糖信号,还可能通过响应激素或光照参与植物成花途径。
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