基于自然衰老动物模型育麟方改善卵巢功能的研究

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目的建立稳定可靠的自然衰老卵巢储备功能下降(DOR)模型;通过观察育麟方干预后卵巢储备功能下降模型动情周期的变化,基础卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、FSH/LH、抗苗勒管激素(AMH),卵巢组织学及卵泡计数等;探索育麟方对卵巢功能的保护和改善作用,对卵巢颗粒细胞分泌功能的影响及其作用机制,与育麟方治疗卵巢储备功能下降患者的临床疗效相互验证,并为拓展育麟方临床研究奠定基础。方法选取6-8周龄SPF级健康性成熟C57BL/6小鼠,质量17.7±1.0g,通过阴道脱落细胞涂片,筛选具有规律动情周期的小鼠7只作为青年对照组。选取7-8月龄的退役C57BL/6小鼠50只,质量28.9±1.7g,观察其动情周期,其动情周期延长或动情周期紊乱者为造模成功。造模成功小鼠随机分为5组,即育麟方高剂量组、育麟方中剂量组、育龄方低剂量组、脱氢表雄酮(DHEA)组、模型组,分别予育麟方不同剂量和DHEA治疗40d后(青年对照组、模型组予等量蒸馏水),于第二天早上处死。观察小鼠一般情况,记录动情周期,计算卵巢指数,放射免疫法测定小鼠血清FSH、LH、FSH/LH水平及AMH表达水平,光镜下观察卵巢组织学变化、卵泡数目及黄体数目。临床上根据纳入标准及排除标准选取30名卵巢储备功能下降患者入组,予育麟方加减治疗3个月,比较其治疗前后患者月经周期变化情况,FSH、LH、基础雌二醇(E2)、FSH/LH水平变化。结果(1)自然衰老可造成C57BL/6小鼠卵巢储备功能下降。(2)与模型组比较,育麟方高、中剂量组和DHEA组小鼠血清FSH、LH水平有显著改善(P<0.01);与模型组比较,育麟方高、中、低剂量组及DHEA组血清AMH水平显著增高(P<0.01);与模型组对照,育麟方高剂量组卵巢指数显著增高(P<0.05);与模型组比较,育龄方高、中剂量的初级卵泡数、卵泡总数显著增多(P<0.05);(3)临床病例治疗后与治疗前FSH、FSH/LH水平有显著改善(P<0.05)。结论(1)育麟方能改善卵巢储备功能下降模型小鼠动情周期及一般生理状况。(2)育麟方能明显影响模型小鼠FSH、LH水平。育麟方能显著提高模型小鼠AMH分泌水平。(3)育麟方能促进卵巢内卵泡的生长发育,并可能改善卵泡质量。(4)临床上运用育麟方能改善卵巢储备功能下降患者的卵巢功能,提高卵巢反应性。
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