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为研究梨属自然变异单株‘PY-9’的生理及矮生机制,本试验选用‘PY-9’为试材,通过对‘PY-9’矮生型梨和普通型梨枝条导管结构观察、花粉粒和叶片表皮结构的扫描电镜观察,及cDNA-AFLP技术分析,探索矮生型梨‘PY-9’的矮化生理特性和矮生机理,其主要研究结果如下: 1、矮生型与普通型梨砧木枝条导管解剖结构观察结果显示:矮生型梨砧木‘PY-9’、‘BA29’、‘OHF87’、‘东7-7’、‘中矮Ⅱ号’、‘FOX11’等导管分子长度和直径均小于普通型梨砧木杜梨、豆梨、砂梨、秋子梨、木梨、川梨、杏叶梨、柳叶梨等,以上结果指出,矮生型梨砧木具有短导管性和窄导管性,这种导管分子特性在一定程度上限制水分和无机盐类的运输,引起矮生型梨砧木生长缓慢,树体矮小;同时,矮生型梨的小导管性,可能引起细胞伸长受限,导致梨砧木茎节间缩短,树势减弱,表现出矮生现象。 2、通过对矮生梨和普通型梨花粉粒及叶片表皮结构扫描电镜观察比较指出:矮生型梨‘PY-9’花粉的条脊宽、条脊距、穿孔直径、穿孔频率等均大于普通杜梨,且显著差异,因此,花粉的形态结构也可作为梨树矮生性状的早期鉴定指标之一。从叶片表皮结构观察结果指出:矮生型梨‘PY-9’的叶片表皮蜡质层较厚,具有明显的角质唇,且气孔开张度小;另外,矮生型梨‘PY-9’的气孔密度大于普通型杜梨,气孔密度具有稳定的遗传特性,气孔密度的差异与树体的性状相关,可以作为预测梨属植物矮化性状的一种形态指标。 3、采用cDNA-AFLP技术分析,通过对矮生型‘PY-9’与普通型植株嫩茎差异表达基因分析结果显示:利用128对EcoRⅠ和MseⅠ引物组合进行选择性扩增,其中98对引物组合的扩增特异性较好,回收、克隆和序列测定最终获得差异性片段(Transcript-derived fragment,TDF)75条,并对这些基因序列进行了生物信息学分析和功能鉴定,BlastX同源性分析表明,其中33条具有高度同源蛋白,涉及F-box蛋白家族、细胞色素P450、UDP葡萄糖基转移酶、纤维素合酶蛋白、PPR蛋白、UPF049蛋白等,功能涉及转录调控、信号转导、防御反应、能量和物质代谢等;其中18条TDFs功能未知,24条差异表达基因在GenBank数据库中未找到相似序列,推测为新基因。