【摘 要】
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菊花（Chrysanthemum morifolium）,原产于我国,作为世界四大切花之一深受人们的喜爱。随着菊花栽培的日益增多,病害问题也日渐突出。菊花黑斑病与菌核病多发生于春秋两季,空气湿度大的环境条件下极易发生大面积传播与感染。目前人们对于黑斑病和菌核病的防控也以加强田间管理和使用传统的杀菌剂为主。筛选优良的抗病资源和合理的病害防控成为最直接有效的方法。但是关于菊花黑斑病和菌核病的研究仍相对
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菊花（Chrysanthemum morifolium）,原产于我国,作为世界四大切花之一深受人们的喜爱。随着菊花栽培的日益增多,病害问题也日渐突出。菊花黑斑病与菌核病多发生于春秋两季,空气湿度大的环境条件下极易发生大面积传播与感染。目前人们对于黑斑病和菌核病的防控也以加强田间管理和使用传统的杀菌剂为主。筛选优良的抗病资源和合理的病害防控成为最直接有效的方法。但是关于菊花黑斑病和菌核病的研究仍相对较少。本研究主要通过对菊花黑斑病和菌核病的病株进行病原菌分离鉴定,分析病原菌的生物学特性,进行切花菊品种资源的筛选与抗性分析,以及不同杀菌剂的防控效果试验,为菊花黑斑病和菌核病的抗病机理与抗病育种研究奠定基础。主要研究结果如下:1.从菊花生产基地采集黑斑病病株,采用组织分离法培养纯化得到病原菌A,通过形态学特征观察、致病力鉴定和18s rDNA-ITS分子序列分析确定为链格孢菌Alternaria alternata。通过对28个切花菊品种进行抗病性筛选,得到7份抗病材料,占比25.00%,包括有‘南农清泉’和‘南农碧云’等,病情指数分别为7.32和15.97;12份中感材料,占比42.86%,有‘南农火山’和‘南农烟霞’等,病情指数分别为35.71和41.65;9份感病材料,占比32.14%,有‘南农紫云英’和‘南农小丽翠’等,病情指数分别为70.86和72.18。2.从菊花生产基地采集菌核病病株,采用组织分离法培养纯化得到病原菌Cm-H,通过形态学特征观察、致病力鉴定和18s rDNA分子序列分析确定为核盘菌Sclerotinia sclerotiorum。通过对核盘菌的生物学特性测定发现,最适培养基为YEPD培养基,菌落直径达到79.33 mm;在25℃生长最快,菌落直径达到59.15 mm;pH在中性偏酸性环境时生长较好,pH6的菌落直径达到48.17mm;对碳源的种类要求不严格,以蛋白胨为氮源时生长较好,菌落直径达到19.70 mm。3.通过菌核病菌饼接种与菌丝悬浮液接种对比试验发现,菌丝悬浮液接种后的发病率和菊花叶片的病斑直径都要明显高于菌饼接种,其中OD600为2时发病率达到100%,病斑直径为36.17mm;33份切花菊品种离体与活体的接种比较试验结果发现,离体与活体接种具有显著相关性,相关系数达到0.823,因此离体可以代替活体进行品种材料抗性筛选。4.通过叶片离体接种对141份切花菊品种进行菌核病抗性筛选,结果发现感病材料35份,占比24.82%,包括有‘南农绿茵’和‘南农桃点’等,病情指数分别为88.15和91.67;中感材料93份,占比65.96%,有‘南农烟花’和‘南农紫枚’等,病情指数分别为59.67和60.12;中抗材料13份,占比9.22%,有‘南农俏桂’和‘南农霞光’等,病情指数分别为30.58和43.09;并未筛选出抗病材料。不同菌核病抗感品种通过电镜扫描大小0.1 mm2叶片的结果表明,中抗品种的表皮毛数量要普遍高于感病品种,最多的为‘南农彩丝带’,达到5.17个;而气孔的数量则相对低于感病品种,最低的为‘南农白蝴蝶’,达到9.33个;中抗品种的腺体的数量显著高于感病品种,其中‘南农白蝴蝶’最多达到1.56个。同时测定了CAT、PAL和PPO酶活性,研究结果发现,接种后植株的酶活性均出现一定程度的升高,且中抗品种的相对酶活性要普遍高于感病品种。对于CAT酶,相对酶活在24h达到最高,随后开始下降,其中‘南农白蝴蝶’最大为56.43 mg·g-1·min-1,最低为感病品种‘阿美的’,只有26.15 mg·g-1·min-1。对于PPO酶,则在48 h达到最高,其中最高为‘南农芝士’,达到68.69 mg·g-1·min-1。对于PAL酶,24h酶活各处理间差异较小,48h出现显著下降,其中感病品种‘蒙白’下降最多,为27.67 mg·g-1·min-1。5.通过平板抑制试验测定供试的7种杀菌剂的毒力方程和EC50,结果发现氟酰胺和肟菌酯对核盘菌具有非常良好的抑制效果,EC50分别为0.093 mg·L-1和0.65 mg·L-1。在用杀菌剂处理核盘菌后测定其草酸、甘油、纤维素酶含量发现,氟酰胺和肟菌酯的效果最为明显,其中草酸含量分别为5.88 μg·mL-1和6.94 μg·mL-1,甘油含量分别为1.11 mg·mL-1和 1.14mg·mL-1,纤维素酶活分别为0.043 U·g-1min-1 和0.039U·g-1min-1。此外,通过直接接种活体植株后喷施杀菌剂发现,氟酰胺和肟菌酯的防治效果显著高于其他处理,分别达到了 98.26%和90.93%。
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