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目的:蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)为一种致命性的脑血管疾病,是神经外科非常多见的危急重症,有很高的发病率和致死致残率。SAH后早期脑组织的损伤往往发生在SAH后的72小时内,这被称为早期脑损伤(early brain injury,EBI)。这一阶段发生的急性病理生理事件,被认为是干预并治疗SAH患者的基础。白质占了人脑组织的一半以上,比灰质更容易受到缺血/出血性中风的影响。双亮氨酸拉链激酶(Dual leucine zipper kinase,DLK),在结构上属于混合谱系激酶(Mixed lineage kinase)家族,功能上则是MAPKKK(MAP kinase kinase kinase)中一员。DLK是一种有丝分裂原激活的蛋白激酶-激酶-激酶,控制神经发育过程中的轴突生长,凋亡和神经元变性,以及对成年神经系统的各种损伤后的神经变性。本研究以Sprague Dawley大鼠(SD rats)为研究对象,以颈内动脉血管穿刺建立SAH损伤模型。侧脑室注射DLK重组蛋白或DLK腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)进行干预,通过神经行为学、免疫荧光(Immunofluorescence,IF)、透射电子显微镜(Transmission electron microscope,TEM)、磁共振弥散张量成像(Diffusion tensor imaging,DTI)等手段观察DLK对于大鼠SAH后白质轴突损伤的调节作用,在重组蛋白或AAV干预DLK/MKK7/JIP3后通过WB探寻DLK对SAH后轴突损伤的调节机制。方法:1.使用改良的神经功能行为学Garcia评分、平衡木(Beam Balance)评分和转棒试验(Rotarod test)以及干湿重法检测SAH后在EBI期内3 h、6 h、12 h、24 h和72 h各时间点大鼠的神经损伤和脑水肿,实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)、Western blot检测上述各时间点的DLK、β淀粉样蛋白前体蛋白(Beta-amyloid precursor protein,β-APP)。2.侧脑室注射DLK腺相关病毒或DLK重组蛋白从而下调或上调DLK的表达,Garcia、Beam Balance和Rotarod test检测大鼠神经功能行为学改变,干湿重法检测大鼠脑水肿。TEM、DTI检测大鼠的白质轴突损伤,冰冻切片IF检测β-APP和DLK的表达。通过WB检测DLK/MKK7/JIP3/p-JNK/β-APP以探究DLK对SAH后轴突损伤调节的机制。结果:1.SAH后DLK、β-APP表达增高并在24 h达到高峰。神经行为学表现在SAH12 h后即出现明显损伤,脑组织含水量在SAH后24 h后明显提高。2.抑制DLK可以改善SAH后大鼠的神经行为学表现,减轻脑水肿,荧光切片发现β-APP表达减少,透射电镜观察到轴突亚细胞结构损伤大大减轻,DTI也发现白质纤维素的走行和完整性大为改善,过表达DLK则会使上述改变均被逆转。与对照组相比,敲低DLK后,MKK7表达会降低,JIP3反而增加,JNK的磷酸化程度会降低,β-APP表达减少,而过表达DLK则使得通路中的各蛋白表达结果与敲低DLK的结果相反。敲低MKK7后,上游的DLK表达无差异,下游的JIP3表达无差异,JNK的磷酸化程度降低,β-APP表达无差异。敲低JIP3后,上游的DLK表达无差异,而MKK7表达减少,下游的JNK磷酸化下降,β-APP表达无差异。结论:1.SAH后EBI期内,DLK表达会上升,并产生轴突损伤,DLK的累积以及轴突损伤均在24 h达到高峰,EBI早期即存在神经损伤以及脑水肿。2.大鼠SAH后,抑制DLK具有明显的神经损伤保护、脑水肿保护及白质轴突保护作用,而过表达DLK则会逆转SAH后的神经保护、血脑屏障(Blood-brain barrier,BBB)保护及白质轴突保护作用,上述作用是通过DLK/MKK7/JIP3/p-JNK参与调节SAH后白质轴突损伤的从而参与EBI的病理过程。