近年来,国内外投入大量的人力物力对缺血性脑血管病进行研究,研究的机制主要包括神经元代谢障碍、微循环障碍、能量耗竭、酸中毒、兴奋性氨基酸毒性作用、自由基损伤、炎症细胞因子损害、氧化性损伤、离子失调、坏死和凋亡、血脑屏障破坏等,但这些归根结底无非是在脑缺血缺氧基础上发生的,如果能早期恢复血供无异于从根本上解决问题,实现了让脑组织自己做搭桥。有研究表明,新生血管密度和脑梗死的预后密切相关[1]。临床工作中早期溶栓显示较好的临床效果更证实了及时恢复血供、建立侧枝循环对脑缺血治疗的重要性。但溶栓指征严格,临床上适合溶栓的病人不足3%[2],因此研究一种能促进脑缺血周围组织血管新生的方法成为治疗缺血性脑血管病的重要策略。治疗性血管新生由此备受关注,近年来国内外已研究出各种各样的治疗性血管新生的方法,包括干细胞移植、基因治疗、蛋白质治疗。但是这些疗法不仅价格昂贵,操作复杂,难以在广大患者中推广,并且安全性不能保证。中医药凭借其优势引起了研究者的注意,成为了治疗性血管新生的研究重点。缺血性脑血管病隶属中医中风范畴,“素体气虚,不能行血,以致血瘀”是其主要发病理论,补气活血法能够“行气通脉、活血化瘀”,是治疗脑梗死的主要治法。康脑液2号是由补气活血方补阳还五汤化裁而来,在临床工作中取得良好效果。本实验主要研究康脑液2号治疗缺血性脑血管病的作用机制,实验主要由以下几部分组成:1大鼠脑缺血再灌注模型制备、分组及给药方法168只雄性SD大鼠随机分为正常组(A)、假手术组(B)、模型组(C)、康脑液2号高剂量组(D)、康脑液2号中剂量组(E)、康脑液2号低剂量组(F),正常组及假手术组各12只,其余每组各36只。模型组及康脑液2号各治疗组用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉闭塞(Middlecerebral artery occlusion,MCAO)模型,大鼠缺血2h后再灌注。大鼠于手术前7d开始灌胃给药，每日1次，直至处死。正常组、假手术组、模型组给予等体积的生理盐水。2大鼠神经功能评分、脑梗死体积及病理变化观察于大鼠手术苏醒后及再灌24h后观察神经功能缺损评分，评分标准参照Longa 5分制评分方法[3]。再灌注24h后每组取6只大鼠TTC染色方法观察大鼠脑梗死体积。大鼠再灌后1d、3d、7d、14d、21d HE染色方法观察大鼠脑组织病理变化。结构显示：和模型组相比，康脑液2号治疗组大鼠神经功能评分显著改善，脑梗死体积百分比23.89±0.80，较模型组46.22±0.42明显减少（P＜0.01），病理损伤比模型组明显较轻。3大鼠脑组织促血管新生因子表达的观察分别于大鼠再灌后1d、3d、7d、14d、21d免疫组织化学方法观察促血管新生因子血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、血管生成素-1（angiogenin-1，Ang-1）的表达，免疫荧光方法观察碱性成纤维生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF），原位杂交方法测定VEGFmRNA、Ang-1mRNA的表达。结果显示：在各促血管生成因子高峰期，康脑液2号治疗组VEGF表达55.09±4.74、Ang-1表达41.54±5.11、bFGF表达40.71±3.35，模型组分别表达32.51±3.54、20.19±5.01、32.82±3.18，相比均有明显区别（P＜0.01），说明康脑液2号能明显促进脑缺血再灌注大鼠促血管新生因子表达。4肉眼观察大鼠脑组织血管分布情况于大鼠再灌注21d，肉眼观察各组大鼠脑组织血管生长情况，观察可见模型组脑缺血区域明显的脑组织液化、坏死，脑表面血管分布稀少，血管分支紊乱。康脑液2号各治疗组均较模型组改善，尤其是中高剂量治疗组脑表面血管数目明显增加，呈辐射状排列向病灶部位聚集，分支大部分已覆盖脑缺血病灶。5大鼠脑组织血管密度检测于大鼠再灌后21d免疫荧光法标记CD34观察各组大鼠脑组织血管，最后参照Weidner法[4]进行微血管密度(microvessel density，MVD)计数研究显示:和模型组38.22±3.25/mm~2相比,康脑液2号治疗组血管新生50.39±4.80/mm~2,血管密度明显增大(P<0.01)。综上所述,康脑液2号能显著改善局灶性脑缺血再灌注大鼠神经功能、脑组织病理变化,并能明显减小脑梗死体积,说明康脑液2号是治疗脑梗死的良方。又通过观察康脑液2号对脑梗死大鼠促血管新生因子及血管密度,结果表明促进脑组织血管新生是康脑液2号治疗脑梗死的可能途径之一。