蜡蚧轮枝菌耐热性菌株的筛选及耐热性机理的初步分析

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为筛选适用于夏季炎热季节的菌株和剂型,本文筛选了蜡蚧轮枝菌(Lecanicillium lecanii)高耐热性菌株,研究了蜡蚧轮枝菌疏水蛋白,初步分析了蜡蚧轮枝菌分生孢子的耐热性机理。本研究取得的结果如下:1.从实验室保存的25株菌株中筛选出高、中、低三个水平的耐热性菌株,通过测定在不同时间梯度48℃的温度下胁迫的孢子存活率,用逻辑斯蒂模型拟合,测定不同蜡蚧轮枝菌菌株的耐热性。25株菌株对48℃热胁迫LT50平均值为4.647min,其中蜡蚧轮枝菌V3861的LT50=10.56min是25株中的最大值,而V6888的LT50=0.06960min则是最小值。2.从筛选出的高、中、低三株不同耐热性菌株的杀虫毒力比较,以桃蚜(Myzus persicae)和榕管蓟马(Gynaikothrips ficorum)为试虫。测定了不同耐热性菌株毒力,结果表明,在30℃和26℃条件下,高耐热性菌株V6791毒力最强,LT50分别为2.362d(M. persicae)和3.453d (G. ficorum)。中等耐热力菌株V62毒力最弱LT50分别为3.482d(M persicae)和3.913d(G. ficorum)。3.利用Ⅰ型疏水蛋白的提取方法,提取了9株代表型菌株的疏水蛋白,通过BCA方法测定了含量,对提取出来的疏水蛋白进行SDS-PAGE电泳分析,对疏水蛋白进行质谱鉴定。结果表明V6791的疏水蛋白含量21.71829±3,33165μg/mg显著高于其他菌株,而Vp28菌株疏水蛋白含量15.00607±0.820643μg/mg也显著低于其他菌株。电泳实验结果显示,9株菌株均出现了两条蛋白条带,一条为11.3kD另一条约为2.7kD。质谱结果分析,由于两个蛋白的匹配蛋白都相同,结果推出2.7kD蛋白条带是11.3kD的亚基,推出蜡蚧轮枝菌疏水蛋白中含有二硫键。
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