噬菌蛭弧菌的分离、鉴定、培养及其对细菌的抑制作用

被引量 : 0次 | 上传用户:lf740047016
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
蛭弧菌为革兰氏阴性细菌,它能够攻击其它的革兰氏阴性细菌,穿透其周胞质,在细胞质中增殖,最后裂解细胞膜,释放寻找下一个目标。它能够在宿主菌双层琼脂平板形成噬斑。根据这一特性,从174份水样中分离得到21株菌株。经过筛选,获得一株在37℃正常生长的菌株,命名为BD5W。用噬菌蛭弧菌特异性引物经PCR鉴定为噬菌蛭弧菌。将该菌株16S rDNA部分序列与GenBank上蛭弧菌属其它序列进行同源性比较,结果分离菌株BD5W与B. Bacteriovorus HD 100和B. Bacteriovorus HD 127的同源性最高,达到99.4%;与Bacteriovorax sp. EEA分离株差异最大,同源性仅为10.5%。系统发育进化树分析,蛭弧菌属可以分为两个进化分支,分离菌株BD5W属于噬菌蛭弧菌分支。噬菌蛭弧菌BD5W抗生素敏感性试验表明,分离株BD5W对多粘菌素B低度敏感,对麦迪霉素、四环素、洁霉素中度敏感。在不同温度下,BD5W的存活力不同。在30~39℃时,BD5W活菌数保持在108pfu/mL;在37℃和38℃下,23h即有噬斑形成;12℃生长缓慢,4℃以下不生长。液体培养基OD600值反映细菌的含量。通过测定液体培养基OD600(595nm)值,了解噬菌蛭弧菌的增殖情况。试验表明,BD5W能够在pH4~9的条件下生长,最适pH值为7。一系列培养试验表明,1/10YT和1/50YT培养基能够加速分离株BD5W对宿主菌(K88大肠杆菌)的裂解。在1/50YT培养基中培养140h后,OD600值可下降60.4%,在培养基中添加0.05M NaCl、0.05mM KCl、1mM MgCl2和1mM CaCl2,能增强BD5W噬菌能力,23h内OD600值下降了75.7%。试验中还发现分离株BD5W在1/100YT、1/200YT、1/500YT稀释培养基条件下,对热致死宿主菌的裂解能力高于活菌,然而在1/10 YT、1/50 YT稀释培养基条件下,结果却相反。体外试验表明,噬菌蛭弧菌BD5W能够裂解K88大肠杆菌、K99大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、兔波氏杆菌等致病菌。噬菌蛭弧菌BD5W还能轻微裂解猪链球菌2型,但不能裂解多杀性巴氏杆菌,金黄色葡萄球菌。将分离株BD5W以107pfu/mL浓度给小鼠灌胃,试验组和对照组均健康,证明噬菌蛭弧菌对小鼠没有毒性作用。以107pfu/mL和105pfu/mL浓度的噬菌蛭弧菌BD5W治疗人工感染鼠伤寒沙门氏菌小鼠,小鼠存活率分别为90%和80%,未治疗组存活率仅为50%。表明噬菌蛭弧菌BD5W对该病有良好的治疗效果。噬菌蛭弧菌BD5W能够裂解病原性致病细菌,可以作为一种微生态制剂,用于自然水体净化,以及预防和治疗动物体的细菌疾病。
其他文献
合拍片并不是一个新近发明的概念,但与它相关的问题却构成了当下中国电影学术共同体内讨论的一个热点话题。一方面,合拍片是中国电影产业化进程中的必由之路,另一方面,"合拍
锌营养已成为限制苹果产量和质量的重要因素。苹果树缺锌导致小叶簇生,节间缩短等生理病害,而常规补锌措施难以收到良好的效果。为了掌握缺锌胁迫条件下苹果树体锌吸收、运转
土地是一切资源和环境要素的载体,其可持续利用对可持续发展战略的实施具有重要的意义。然而,对土地资源的掠夺式使用已经威胁到人类的生存与发展,迫切要求土地资源可持续利用评
赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)普遍存在于谷物等粮食和动物饲料中,是一种可以引起癌症的霉菌毒素。为了快速检测OTA,利用荧光染料PicoGreen识别双链DNA原理,建立了一种基于
本文论述了中国当代文化整合的理论内涵,从世界历史角度和日常生活角度探讨了文化整合的必要性。论述了近现代中国曾经出现的几个有代表性的文化整合理论。笔者认为:中国当代的
美术教育是一种创造性精神生产,它是一项非常复杂的审美作活动。情感教育在美术课堂教学过程中起着极为重要的作用,没有情感,就没有艺术创作。情感教育不仅是引发学生创作冲
麦克卢汉是20世纪最负盛名和饱受争议的媒介理论家,随着信息社会的到来,媒介技术日新月异的快速发展和对人类社会的深入影响不断证实着麦克卢汉媒介理论的前瞻性和合理性。然
大陆对早期电影历史生的回顾,即使在国产电影诞生近百年后,其表达一直受到1949年后形成的历史史观与话语编码体系的内在制约。1990年代内地电影制作商业化比重增加后,一些影
本文通过总结无穷小量、麦克劳林公式、泰勒级数,归纳出函数一般的替换方法,给出了利用此法求极限的方法,这是利用等价无穷小与中值定理求极限的推广方法.
在求极限的教学实践过程中,我们发现不同题型其方法不尽相同,但又有通用的规律,在教学实践总结时,我们将其中几种常规方法进行充分探究,现在本文中将成果进行如下阐述,并概括