粪肠球菌抑制食源性致病菌的研究

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近年来,随着我国食品工业生产技术的发展,食品种类与数量的也呈倍数级的方式增长,这也同时需要先进的技术来保障我国的食品安全,但由于食源性致病菌所导致的食物中毒事件仍然是威胁全球的世界性食品安全的公共卫生问题。粪肠球菌因其无害低副作用作为新型微生物制剂可被用于食品中,本文的主要通过研究粪肠球菌对四种食源性致病菌的生长所造成的影响,及各菌株的生长状况,采用平板菌落计数等方法绘制菌落生长曲线,探究粪肠球菌被用于食品中微生物制剂抑制食源性致病菌生长的可行性。本文主要研究结果如下:通过观察粪肠球菌抑制两种革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌与单核细胞增生李斯特氏菌)的特性实验并对比其生长曲线图发现:尽管粪肠球菌与金黄色葡萄球菌的共同培养造成了金黄色葡萄球菌对数中期ML、对数后期LL、生长前期ES、生长期S时期较金黄色葡萄球菌单独培养时延后,但比较其单独培养与粪肠球菌共同培养相比,金黄色葡萄球菌的菌体浓度略有下降,反观粪肠球菌在与金黄色葡萄球菌共同培养期间菌体浓度较单独时的菌体浓度提高了925倍,可得知粪肠球菌对金黄色葡萄球菌的抑制作用不明显,但金黄色葡萄球菌能促进粪肠球的生长。粪肠球菌与单核细胞增生李斯特氏菌的共同培养期间ML、LL、ES、S的时间较单核下包增生性李斯特菌单独培养总体延迟了1h,单核细胞增生李斯特氏菌的生长速率有明显放缓。较单核细胞增生李斯特氏菌在两种培养环境下最高菌体浓度由4.0×1011CFU/m L log下降至5.1×10~9CFU/m L log,菌体浓度下降约1019倍,粪肠球菌对其造成的抑制效果显著。通过观察粪肠球菌抑制两种革兰氏阴性菌(沙门氏菌与大肠杆菌O157:H7)的特性实验并对比其生长曲线图发现:粪肠球菌与沙门氏菌的共同培养造成了沙门氏菌在ML、LL、ES、S时期较其单独培养时延后1h,沙门氏菌的生长速率放缓,再比较其在不同培养环境下由单独培养时最高的菌体浓度由3.2×1011CFU/m L log到共同培养时最高菌体浓度为2.91×10~9CFU/m L log,菌体浓度下降约100倍,粪肠球菌对沙门氏菌的抑制作效果明显。粪肠球菌与大肠杆菌O157:H7的共同培养期间ML、LL、ES、S的时间较大肠杆菌O157:H7单独培养总体延迟了1.5h,大肠杆菌O157:H7的生长速率有明显放缓。较大肠杆菌O157:H7在两种培养环境下最高菌体浓度由4.0×1011CFU/m L log下降至5.1×10~9CFU/m L log,菌体浓度下降约50倍,粪肠球菌对其造成的抑制效果显著。通过研究粪肠球菌的抑菌特性,进一步探究了粪肠球菌作为生物抑菌剂在食品中的应用,通过设计不同浓度的粪肠球菌菌液制备抑菌剂对污染了大肠杆菌O157:H7的熟肉制品和污染了产气荚膜梭菌的果蔬汁饮料的抑菌试验研究,结果表明熟肉制品中空白组在12 hours达到的最高菌落数7.10±0.10 CFU/m L log比较经处理组在12 hours达到的最低菌落数6.20±0.07 CFU/m L log,抑菌剂的抑菌效果理想。果蔬汁饮料中空白组在12 hours达到的最高菌落数6.80±0.01 CFU/m L log比较经处理组在12 hours达到的最低菌落数5.10±0.37 CFU/m L log,抑菌效果较为理想。从猪肉脯的应用实验中发现经过抑菌剂处理的大肠杆菌O157:H7的菌落平均浓度要比空白组的小,芒果汁的应用实验中也发现经过抑菌剂处理的产气荚膜梭菌的菌落平均浓度要比空白组的小,这为以后的食品抑菌提供理论参考。
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