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异黄酮是黄酮类化合物中的一种,主要存在于豆科植物中,因此被称为大豆异黄酮。大豆异黄酮是大豆生长中形成的一类次生代谢产物,它主要存在的化学形式是结合型的糖甙。大豆异黄酮具有多种生物活性,在保健食品及药物制品中有十分广阔的应用前景,特别是抗肿瘤,抗心血管疾病引起了科技工作者的关注。目前大豆除一部分用作食用外,大部分用作油料资源,榨油后的豆粕常用作肥料或饲料,存在于其中的大豆异黄酮就此流失,这无疑是对极宝贵的分布十分有限的大豆异黄酮资源的浪费。 为了实现愈见贫乏的全球资源的优化利用,造福人类,以满足全社会对保健功效卓著的大豆异黄酮的需求,迫切需要研究开发从大豆和豆粕中富集提取大豆异黄酮。 本文正是根据这个需要,较系统研究了以豆粕为原料,用乙醇及水溶液提取其中的异黄酮,并用溶剂萃取和酸水解糖甙获得异黄酮甙元,还对大豆异黄酮甙元混合物的NMR谱进行了指纹图谱分析和定量研究,获得了如下结果: 1.以豆粕为原料时最优化的提取水解条件为:乙醇水溶液浓度70%,提取液料比为1:16,回流提取时间6h,用HCl/N-503在30℃水解萃取2h。方法简单易行,重现性好,产品纯度高,提取率可达39.13%。 2.利用核磁共振一维1H-NMR、13C-NMR和二维1H-1H COSY、HMQC、HMBC、多脉冲DEPT实验对豆粕溶剂提取、萃取-酸水解完全后的产物进行了指纹图谱分析。经分析确定了豆粕最后的水解产物中主要为染料木素和大豆素两种甙元,为混合物的NMR指纹图谱分析提供了有利的依据。 3.大豆提取物(SOB)不经任何前处理,直接测定1H-NMR谱,分析1H-NMR谱图中异黄酮的特征指纹峰,成功地归属了大豆异黄酮甙对应的三种甙元的质子信号,这不仅大大地简化了实验步骤、节约