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第一部分:肾组织石蜡切片免疫荧光检测在诊断X连锁Alport综合征中的应用目的:建立X连锁Alport综合征(XLAS)肾组织石蜡切片Ⅳ型胶原α5链免疫荧光检测方法,探讨其临床应用价值。方法:将对照组及XLAS患儿各4例肾组织,分别行石蜡切片及冰冻切片Ⅳ型胶原α5链间接免疫荧光染色,比较分析染色结果。石蜡切片分别采用微波修复、胃蛋白酶消化及微波修复+胃蛋白酶消化三种抗原修复方法进行修复,比较三者的修复效果。结果:单独微波修复、胃蛋白酶消化均不能修复肾组织Ⅳ型胶原α5链,微波修复+胃蛋白酶消化法可修复α5链。组织经微波修复10min,胃蛋白酶消化10min后,抗α5(Ⅳ)链免疫荧光染色在XLAS女性患儿肾小球基底膜(GBM)为间断不连续阳性表达,男性为阴性表达。荧光染色结果均与冰冻切片一致。结论:经微波修复+胃蛋白酶消化双抗原修复法的石蜡切片免疫荧光检测肾组织Ⅳ型胶原α5链能较好地应用于XLAS诊断,可对既往临床不典型XLAS病例进行回顾性诊断,为XLAS的诊断和研究提供了一种可靠的技术手段。第二部分:中国西南地区儿童Alport综合征临床及病理特点目的:分析中国西南地区儿童Alport综合征临床及病理特点。方法:回顾性分析中国西南地区20例AS患儿病例资料,采用间接免疫荧光法检测Ⅳ型胶原α链在患儿肾脏、皮肤组织的表达,并比较不同临床表型的AS患儿的临床及病理特征。结果:该组患儿以血尿合并蛋白尿为最常见首发症状,首发症状为孤立蛋白尿的患儿24h尿蛋白水平较血尿合并蛋白尿者高(P<0.05)。有蛋白尿的患儿其家族中尿毒症患者的比例(6/16)较血尿表现者多(1/4),但无统计学差异。光镜病理改变以轻—中度系膜增生性肾小球肾炎(70%)多见,不同临床表型的AS患儿其病理类型分布无统计学差异(P>0.05),60%的AS存在间质细胞泡沫样,其尿蛋白水平明显高于无间质泡沫样改变者(P <0.05)。肾脏α5(Ⅳ)链免疫荧光结果分析,15例(75%)为X性连锁显性遗传性AS(XLAS),余5例尚不能根据α5(Ⅳ)链的缺失判断其遗传类型。2例患儿同时行皮肤基底膜(EBM)α5(Ⅳ)链检测,结果与肾脏检测一致。结论:中国西南地区儿童AS血尿合并蛋白尿是最常见首发症状,主要遗传方式为XLAS(75%)。不同临床表型的AS患儿其病理类型分布无统计学差异,但蛋白尿越重,其肾小管间质泡沫样改变越重。皮肤活检诊断XLAS与肾脏检测结果一致,必要时可替代肾活检,对家系调查筛选携带者及遗传咨询具有重要意义。