急性白血病非血缘脐血造血干细胞移植后早期免疫重建的研究

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目的观察急性白血病患者进行非血缘脐血干细胞移植(Unrelated Cord blood Stem cell transplantation, UCBT)后早期免疫重建的特点和规律,尤其是NK细胞及其表面受体的特点及其对临床的重要性,初步探讨UCBT后早期发挥GVL作用的细胞基础。方法选择安徽省立医院2006年10月至2008年8月接受UCBT的急性白血病患者11例(急性白血病9例,慢粒急性变2例),使用流式细胞术分别检测移植受者UCBT后早期(180天内)NK细胞及其表面受体的重建情况,同时也检测T、B细胞的免疫重建情况。并与外周血联合骨髓移植(以下简称外周血+骨髓移植组)受者早期免疫重建进行比较分析。结果UCBT组在移植后植入时(the day of clinical engrafment Ed)NK细胞即达到一个高值,CD3-56+及CD3-16+NK细胞占淋巴细胞门的比例分别为(35.12±18.62)%及(10.00±5.92)%。呈上升趋势,移植后30天(+30天)CD56+及CD16+NK细胞所占比例分别为:(37.80±17.52)%及(16.72±11.3)%,CD56+NK细胞此时比例达峰值。此后,+60天时CD56+及CD16+NK细胞所占比例分别为:(30.4±12.16)%及(13.72±11.29)%,CD3-56+NK细胞绝对计数此时达峰值为544/μl,CD16+NK绝对计数为245/μl。+90天,CD56+细胞比例为(18.16±17.7)%,CD16+细胞占(10.4±6.24)%,二者逐渐接近。+90天后随着细胞功能的逐渐成熟,CD3-56+NK比例及绝对值逐渐下降,CD3-16+NK细胞比例及绝对值逐渐升高,二者在90天后出现交叉,随后,CD16+NK细胞超过CD56+NK细胞,180天,二者所占比例分别为:(19.30±6.51)%及(10.51±6.54)%;绝对值分别为:553.91±168.98及287±123。与血缘关系外周血+骨髓移植组相比较NK细胞恢复较早,植入时CD3-56+NK细胞所占比例明显高于外周血+骨髓移植组(35.12±18.66 VS 20.3±5.27 p<0.003),有显著性差异。+30天两组所占比例同时达峰值(37.8±17.52 VS 37.1±7.06 p>0.05),此后,两组均呈下降趋势,+60天,UCBT组NK细胞比例再次明显超过外周血+骨髓移植组(30.4±19.14 VS 12.6±4.96 p<0.05),此后,外周血+骨髓移植组迅速恢复,+90天时略高于脐血移植组(23.4±8.52 VS18.15±8.17 p>0.05)。NK表面活化性受体NKG2D的重建早,植入时即高表达,并逐步上升,约+60天达峰值(82.55±9.10)%,此后持续高表达;与外周血+骨髓移植组相比脐血移植组NKG2D重建较早,植入时〔(79.58±8.71)% VS (36.7±14.33 )% P<0.03〕,+30天仍高于骨髓移植组〔(80.03±13.49)% VS (56.8±18.21)% p<0.035〕,+60天时两组水平相当〔(82.55±9.10)% VS (82.3±28.64)% p>0.05〕,90天脐血移植受者NKG2D略有下降((85.82±18.21 VS 90.3±27.89 p <0.01 )。NK细胞抑制性受体NKG2A,UCBT组较外周血+骨髓移植组重建晚,植入时两组分别为(63.9±7.47 VS 90.3±15.35 p<0.01),+30天仍保持此趋势(64.18±10.03 Vs 82.1±25.68 p<0.03),两组差异有显著性。+60天后,UCBT组逐渐升高,超出外周血+骨髓移植组。T细胞重建情况:UCBT组与外周血+骨髓移植组相比重建较晚,植入时含量较低,呈逐渐上升趋势,但+90天内均低于外周血+骨髓移植组(p<0.05),+90天后两组比例相近。结论1.急性白血病患者接受UCBT后免疫重建显示,NK细胞的重建早、占淋巴细胞比例高,而T细胞的重建晚,与外周血+骨髓移植组免疫重建相比恰好相反。2. UCBT后NK细胞表面活化性受体的重建早,NKG2D植入时高表达并持续至+60天,NK细胞抑制性受体重建较迟,与外周血联合骨髓移植组相比结果仍相反,两组之间有显著性差异。提示NK细胞的活化可能在UCBT后早期移植物抗白血病(GVL)作用中承担了重要角色。
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