论文部分内容阅读
慢传输型便秘是功能性便秘的常见类型，占慢性便秘的16％-40％。其病因不明，病理变化不明显，治疗困难，反复发作，严重影响患者生活质量，并易诱发其他系统疾病。研究和治疗该病具有重要的意义。以往的疗效评价研究结果显示，益气润肠方治疗功能性便秘安全有效。本研究旨在通过动物实验进一步阐释益气润肠方治疗STC的作用机制。 目的:研究益气润肠方对STC状态下结肠ICC改变及SCF/c-Kit信号通路影响，进一步揭示该方治疗STC的机制。 方法:48只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、芪蓉润肠口服液组和益气润肠方组，每组12只。正常对照组不造模，其余各组灌胃给予复方地芬诺酯混悬液120天，诱导大鼠STC模型。造模成功后，正常对照组予正常饲料和水喂养;模型组、芪蓉润肠口服液组、益气润肠方组分别灌服等体积生理盐水、芪蓉润肠口服液稀释液及益气润肠方汤药，连续灌药20d。末次给药结束后，肉眼观察大鼠一般情况，用代谢笼测定大鼠24小时排便粒数。而后各组大鼠均禁食不禁水24 h，活性炭悬液灌胃，30min后颈椎脱臼处死，摘除幽门到直肠末端的肠道，松弛状态下计算肠道炭末推进百分率=（碳末前端至幽门的距离/肠道全长）×100％。对每只大鼠切取结肠段区域肌层组织约1cm，分别于中性福尔马林溶液中固定及EP管保存备用。HE染色，观察大鼠结肠的组织结构。进行免疫组化实验，观察结肠ICC的形态，每张切片随机选取5个高倍视野，应用Image-Pro Plus6.0软件分析不同部位ICC的面积和积分光密度。实时荧光定量PCR方法检测SCF mRNA、c-kit mRNA的表达，以2-△△Ct计算目的基因的相对表达量。 结果: 1.大鼠24小时排便粒数:益气润肠方组与模型组相比，24小时排便粒数明显增加(P＜0.01);与芪蓉润肠口服液组相比增加(P＜0.05);与正常对照组相比，其24小时排便粒数的均值有所增加，但经统计学分析无统计学意义(P＞0.05)。 2.炭末推进率:益气润肠方组与模型组相比，结肠炭末推进率提高(P＜0.05);与芪蓉润肠口服液组相比，有所提高，但经统计学分析无统计学意义(P＞0.05);与正常对照组相比，结肠炭末推进率有所提高，但经统计学分析无统计学意义(P＞0.05)。 3.结肠ICC面积及IOD值:正常对照组与模型组相比较，二者有明显的统计学差异(P＜0.01)，正常对照组ICC面积和IOD明显高于模型组。益气润肠方组与模型组相比较，二者有明显的统计学差异(P＜0.01)，益气润肠方组ICC的面积和IOD增加。正常对照组与益气润肠方组相比较，ICC的面积和IOD无明显的统计学差异(P＞0.05)，但益气润肠方组的面积及IOD均值高于正常对照组。芪蓉润肠口服液组与模型组比较，有明显的统计学差异(P＜0.01)，前者ICC面积和IOD明显高于后者。益气润肠方组与芪蓉润肠口服液组相比较，有统计学差异(P＜0.05)，前者ICC面积和IOD高于后者。 4.SCF mRNA和c-kit mRNA相对表达量:与正常对照组相比，模型组SCF mRNA表达量相对降低(P＜0.05)。与模型组相比，芪蓉润肠口服液组和益气润肠方组的SCF mRNA表达量相对升高(P＜0.05)。虽然无统计学意义，但芪蓉润肠口服液和益气润肠方均可使SCF mRNA表达量接近正常对照组(P＞0.05)。与正常对照组相比，模型组c-kit mRNA表达量相对降低(P＜0.05)。与模型组相比，芪蓉润肠口服液组和益气润肠方组的c-kit mRNA表达量相对升高(P＜0.05)。其中益气润肠方对c-kit mRNA表达量的增高程度要超过正常对照组(P＜0.05)。 结论:益气润肠方对STC大鼠的治疗有效，可促进其肠道排空。其可能机制是通过增加SCF mRNA、c-kit mRNA的表达，影响SCF/c-Kit信号通路以增加结肠ICC数量，从而促进了肠道动力。