miR-122是在肝脏中表达量很高的microRNA。有研究表明C/EBPα是miR-122的转录激活因子,AP-2α可以负调控C/EBPα;而miR-122能否反馈调节C/EBPα却未见报道。已知C/EBPα是脂肪前体细胞向脂肪细胞分化成熟过程中的标志基因;我们的研究结果显示,过表达AP-2α后,western blot检测发现C/EBPα表达下降。而在脂肪前体细胞中过表达miR-122,通过半定量PCR和western blot实验检测到AP-2α表达降低,C/EBPα表达上升。为了更直观地从形态学上观察miR-122对脂肪前体细胞成熟的影响,我们利用油红O染色,分析脂肪细胞中脂滴沉积情况。实验结果显示,当过表达miR-122后,脂肪细胞中脂滴沉积增加;过表达AP-2α后,脂肪细胞中脂滴沉积减少;用RNA干扰的方法沉默掉AP-2αα后,脂肪细胞中脂滴沉积明显增加。在大多数情况下,miRNA可通过与靶mRNA的3’ UTR不完全互补配对,阻断该基因的翻译过程,从而调节基因表达。通过targetscan软件分析AP-2αmRNA3’UTR,没有发现miR-122的结合位点。另据文献报道,miRNA除了与靶mRNA的3’ UTR相互作用外,还可能参与DNA甲基化。为了验证miR-122对AP-2αDNA甲基化的影响,我们做了甲基化PCR分析。结果显示过表达miR-122能引起AP-2α DNA甲基化。简而言之,本研究揭示了脂肪前体细胞分化成熟的新机制:miR-122通过促进AP-2α DNA甲基化,在转录水平和翻译水平负调控AP-2α,进而正调控C/EBPα,最终促进脂肪前体细胞分化成熟。而C/EBPα是miR-122的转录激活因子,C/EBPα表达水平的增加会进一步促进miR-122的表达。miR-122、AP-2α和C/EBPα三者之间构成一个正向调控反馈环。由于脂质的过度沉积会导致脂代谢紊乱和有关器官的病理生理变化,如肥胖症、脂肪肝等。可见miR-122在脂肪前体细胞分化成熟过程中调控机制的研究意义重大。