论文部分内容阅读
目的:研究痹肿消汤(Bizhongxiao decoction,BZXD)有效成分之一芹菜素(Apigenin,AP)对小鼠体外活化T细胞活化、增殖及细胞因子基因表达的影响,探讨其在免疫抑制及治疗类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)方面的作用机制。方法:无菌制备小鼠脾脏T淋巴细胞,加入不同浓度的AP(0、20、40、80、120、160μmol/L)并用佛波醇酯(Phorbol-12-myristatel3-acetate,PMA)和离子霉素(Ionomycin,Ion)刺激T细胞活化、增殖;48 h后用MTT法检测T细胞增殖情况;6 h后用RT-PCR法检测T细胞白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)mRNA、干扰素-γ(Interferon gamma,IFN-γ)mRNA及IL-4mRNA的表达情况。结果:1.48h后,PMA+Ion组细胞MTT吸光度(Absorbance,A值)明显高于未刺激组,差异具有统计学意义(P＜0.01)。40、80、120、160μmol/L浓度的AP组各A值均较PMA+Ion组减弱,差异具有统计学意义(P＜0.01)。AP浓度(0、20、40、80、120、160μmol/L)与A值呈显著负相关(r=-0.855,P＜0.01)。2.6h后,PMA+Ion组细胞IL-2mRNA,IFN-γmRNA及IL-4mRNA的表达均较空白对照组增高,差异具有显著性(P＜0.01)。40、80、120μmol/L浓度的AP组上述各细胞因子的基因表达较PMA+Ion组明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.01、),且呈不同程度的抑制。20μmol/L浓度的AP组的IFN-γmRNA及IL-4mRNA的表达较PMA+Ion组表达明显减弱,差异具有统计学意义(P＜0.05),但在IL-2mRNA的表达上无明显差异(p＞0.05)。AP的实验浓度与上述各细胞因子的表达均呈显著负相关(IL-2mRNA:r=-0.965,P＜0.01;IFN-γmRNA:r=-0.944,P＜0.01:IL-4mRNA:r=-0.964,P＜0.01)。各实验浓度AP对PMA+Ion诱导活化的小鼠T淋巴细胞IFN-γmRNA表达的抑制作用强于IL-4mRNA的抑制(P＜0.01)。结论:1.AP能明显抑制对PMA+Ion活化诱导的小鼠T淋巴细胞增殖,提示AP具有免疫抑制作用。2.AP对PMA+Ion活化诱导的小鼠T淋巴细胞IL-2mRNA、IFN-γmRNA及IL-4mRNA表达均具有抑制作用,且对IFN-γmRNA的抑制强于对IL-4mRNA的抑制,提示对Th1/Th2具有免疫调节作用。3.AP是具有上述免疫抑制及免疫调节作用,为BZXD治疗RA的有效成分。