【摘 要】
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为研究神经介素U(neuromedin U,NMU)在鱼类的摄食调控作用,本试验以西伯利亚鲟作为研究对象,克隆西伯利亚鲟NMU、神经介素U受体1(neuromedin U receptor 1,NMUR1)和神经介素U受体2(neuromedin U receptor2,NMUR2)cDNA序列;分析三者的组织分布以及不同禁食状态下的表达水平;通过注射试验,探究了短期腹腔、长期腹腔和短期侧脑室注射
【基金项目】
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四川省教育厅项目(2019YJ0438);
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为研究神经介素U(neuromedin U,NMU)在鱼类的摄食调控作用,本试验以西伯利亚鲟作为研究对象,克隆西伯利亚鲟NMU、神经介素U受体1(neuromedin U receptor 1,NMUR1)和神经介素U受体2(neuromedin U receptor2,NMUR2)cDNA序列;分析三者的组织分布以及不同禁食状态下的表达水平;通过注射试验,探究了短期腹腔、长期腹腔和短期侧脑室注射NMU-25对西伯利亚鲟摄食量、受体和相关食欲因子的影响。结果如下:1.西伯利亚鲟NMU cDNA部分序列长度540 bp,包含成熟肽NMU-25肽。西伯利亚鲟nmu mRNA在检测的22个组织中均广泛表达。其中,nmu mRNA在前脑中表达最高,下丘脑次之。摄食前后试验显示,相比于禁食组,摄食1h后下丘脑、前脑、中脑、小脑和延脑nmu mRNA显著降低;摄食1h和3h后食道、瓣肠、十二指肠和肌肉nmu mRNA显著降低。禁食复投喂试验显示,与投喂组相比,西伯利亚鲟下丘脑中禁食组第1天nmu mRNA显著升高,而在第3、6、10、15和17天禁食组显著降低,在15和17天复投喂组显著高于禁食组。2.西伯利亚鲟NMUR1部分cDNA 338bp,NMUR2部分cDNA 349bp。西伯利亚鲟nmur1和nmur2 mRNA在检测的22个组织中均广泛表达,在下丘脑中表达较高。摄食前后试验显示,相比于禁食组,在摄食1h后下丘脑、食道、瓣肠和十二指肠nmur1 mRNA极显著降低;摄食1h和3h后,下丘脑、中脑、食道、瓣肠和十二指肠nmur2mRNA显著降低。禁食复投喂试验显示,与投喂组相比,西伯利亚鲟下丘脑第1天nmur1 mRNA禁食组极显著升高,在第3、6、10、15和17天禁食组显著降低,在第10、15和17天,复投喂组极显著高于禁食组。与投喂组相比,西伯利亚鲟下丘脑和肝脏第1、3、6、10、15和第17天nmur2 mRNA禁食组显著升高,在第15天,复投喂组极显著低于禁食组。3.短期腹腔注射50、100、200ng/g BW NMU-25降低西伯利亚鲟0-1h的摄食量,以及1h、3h和6h的累积摄食量;短期腹腔注射100ng/g BW NMU-25显著降低下丘脑中apelin、pyy、npy、nmu,显著升高cart和ucn3,nmur1和nmur2的表达量。在胃中,NMU-25显著升高apelin、nmu、nucb2、cck、ghrelin和pyy,极显著降低cart和ucn3,nmur1和nmur2的表达量。长期腹腔注射50、100和200ng/g BW的NMU-25降低1-7天的摄食量和累积摄食量。下丘脑中,长期腹腔注射100ng/g BW NMU-25显著升高nmu、npy、pyy、nucb2、cart和ghrelin的表达,nmur1显著降低,nmur2显著升高;肌肉中,显著降低apelin、cart、npy、pyy、ucn3、nucb2、nmu、cck和ghrelin的表达,nmur1显著升高,nmur2极显著降低。侧脑室注射1、10、100pmol/g BW的NMU-25降低西伯利亚鲟0-1h的摄食量和1、3、6h的累积摄食量。侧脑室注射10 pmol/g BW的NMU-25降低下丘脑npy、ucn3、apelin、cart、nucb2、cck、ghrelin和nmu,显著升高nmur1和nmur2的表达;胃中,显著降低pyy、apelin、nmur1、nmur2,极显著升高npy、ucn3、nucb2、nmu、cart、cck和ghrelin的表达。结论:NMU作为抑食欲因子,可以抑制西伯利亚鲟短期和长期摄食,调控相关食欲因子和其受体的表达在中枢和外周呈现相反的效应,暗示其通过中枢和外周不同的通路调节。
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