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目的:研究T3对下丘脑GT1-7神经元细胞中KISS-1基因表达的影响。方法:1、利用RT-PCR的方法验证GT1-7细胞中KISS-1基因表达。2、分别用realtime PCR和western blotting的方法,观察200ng/ml T3作用GT1-7神经元细胞不同时间(12、24、48、72h)后KISS-1基因m RNA和蛋白表达的变化。3、用TRα、TRβsi RNA转染GT1-7细胞,western blotting检测干扰效果,选择有效的干扰序列转染GT1-7细胞后,T3干预GT1-7细胞24h,用realtime PCR方法测定KISS-1基因m RNA表达。4、构建2kb的KISS-1启动子报告基因体系(PGL3-Kiss1 promoter),不同浓度(0、20、200、2000ng/ml)T3作用GT1-7神经元细胞24h后,运用双荧光素酶报告基因检测系统测定KISS-1启动子活性的变化。结果:1、RT-PCR显示140bpKISS-1条带。2、realtime PCR结果显示:200ng/ml T3作用GT1-7神经元细胞不同时间(12-72h)后,与0h对照组相比,12h组KISS-1m RNA表达增加,但无统计学意义(p>0.05),24h、48h、72h组KISS-1 m RNA表达显著增加(p<0.01),其中48h组KISS-1m RNA表达增加最明显。3、western blotting结果显示:200ng/ml T3作用GT1-7神经元细胞不同时间(12-72h)后,与0h对照组相比,12h组KISS-1蛋白表达开始增加,但无统计学意义(p>0.05),24h、48h、72h组KISS-1蛋白表达显著增加(p<0.01),其中24h组KISS-1蛋白表达增加最明显。4、si RNA转染实验结果:TRα、TRβsi RNA转染GT1-7细胞48小时后,si RNA664、si RNA1259组TR蛋白表达下降。选择有效的si RNA转染GT1-7细胞,200ng/ml T3干预细胞24h,与对照组相比,si RNA664组KISS-1 m RNA表达明显降低(p<0.01),si RNA1259组KISS-1 m RNA表达降低(p<0.05)。5、双荧光素酶报告实验结果:与对照组相比,20ng/ml、200ng/ml、2000ng/ml组KISS-1启动子活性增强,其中200ng/ml组增强作用最明显(p<0.01),当T3浓度超过200ng/ml时,启动子活性增强作用减弱。结论:T3促进下丘脑GT1-7神经元细胞中KISS-1基因的表达。