目的:本研究采用免疫组化方法,通过检测正常胃黏膜、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃癌组织中SPHK1和HIF-1α蛋白的表达,分析两者表达的差异性和相关性,并探讨二者表达与胃癌发生、转移及患者临床预后之间的关系和临床病理意义。　　 方法:临床病例资料收集及组织芯片制作:收集中国医科大学附属第一医院肿瘤外科手术切除胃癌标本254例(其中205例距癌灶边缘大于5cm处取配对正常胃黏膜作为对照),慢性萎缩性胃炎43例,肠上皮化生107例及异型增生17例。常规石蜡包埋,组织蜡块行4μm组织切片,常规HE染色,用于目标组织的定位。采用组织芯片制作仪构建胃癌及癌前病变组织芯片蜡块,行4μm连续切片。　　 免疫组化染色及结果判定方法:采用PV-9000免疫组化二步法检测正常胃黏膜、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃癌中SPHK1和HIF-1α蛋白的表达。兔抗人SPHK1多克隆抗体购自美国Abgent公司,工作浓度为1:100,鼠抗人HIF-1α单克隆抗体购自Santa Crzu公司,工作浓度1:20,免疫组化及DAB显色试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司。用PBS代替一抗做阴性对照。结果判定:SPHK1和HIF-1α蛋白在细胞浆呈现清晰棕黄色特异性免疫反应颗粒为阳性细胞。每一病例随机选择2个高倍镜视野,计数200个细胞,阳性细胞占计数同类细胞百分率＜5％为0分,5％～25％为1分,26％～50％为2分,51％～75％为3分,＞75％为4分。染色强度以阳性细胞呈色反应为准:无特异着色为0分,浅黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分;然后按染色强度和阳性细胞所占的百分比的乘积将结果分为:0分为阴性(-);1～4分为弱阳性(+);5～8分为中度阳性(++),9～12分为强阳性(+++)。　　 结果:SPHK1蛋白在慢性萎缩性胃炎(41.9％)、肠上皮化生(59.8％)、异型增生(82.4％)和胃癌组织(60.6％)中表达的阳性率均显著高于正常胃黏膜(22％)。SPHK1蛋白的阳性表达率在肠上皮化生、异型增生及胃癌各组之间差异均无统计学意义。胃癌Borrmann分型中SPHK1在Ⅲ、Ⅳ型的阳性表达率(64.2％)显著高于Ⅰ、Ⅱ型的阳性表达率(42.9％);淋巴结转移胃癌组SPHK1蛋白阳性表达率(65％)显著高于无淋巴结转移组(50.6％)。SPHK1表达与胃癌患者性别、年龄、WHO组织学分型、Lauren分型及浸润深度未见相关。　　 HIF-1α蛋白在慢性萎缩性胃炎(39.5％)、异型增生(82.4％)和胃癌组织(65.4％,)中表达的阳性率均显著高于正常胃黏膜(24.9％),HIF-1α蛋白的阳性表达率在肠上皮化生、异型增生及胃癌各组之间差异均无统计学意义。胃癌Borrmann分型中HIF-1α蛋白在Ⅲ、Ⅳ型的阳性表达率(69.8％)显著高于Ⅰ、Ⅱ型的阳性表达率(42.9％);淋巴结转移HIF-1α蛋白胃癌组阳性表达率(70.6％)显著高于无淋巴结转移组(53.2％)。而与胃癌患者性别、年龄、WHO组织学分型、Lauren分型和浸润深度未见相关。　　 SPHK1和HIF-1α蛋白在254例胃癌组织中表达呈正相关。SVHK1+/HIF-1α+患者的五年生存率(49.6％)显著低于SPHK1-/HIF-1α-患者五年生存率(50.0％),生存时间分别为31.0±2.586 months和46.0±2.678months,差异有统计学意义。　　 结论:SPHK1和HIF-1α在胃癌和癌前病变中的过表达提示其在胃癌发生、浸润和转移过程中起重要的作用,两者可一同成为胃癌诊断和预警转移有价值的生物标志。SPHK1和HIF-1α在胃癌中表达的相关性提示HIF-1α的过表达可能导致SPHK1表达上调。SPHK1+/HIF-1α+患者与SPHK1-/HIF-1α-患者生存率的显著差异提示两者联合检测可以成为预测患者预后的特异生物标记物。