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目的：课题组前期研究证实了神经纤毛素1（neuropilin-1，NRP-1）在舌鳞状细胞癌组织中较正常舌组织呈阳性表达，本研究通过分析NRP-1与舌鳞状细胞癌病理等级的相关性，以及抑制NRP-1在舌鳞状细胞癌细胞系中的表达来研究其在调控舌鳞状细胞癌细胞分化中的作用，探讨NRP-1在调控舌鳞状细胞癌分化中的可能作用及机制，为针对NRP-1设计的舌鳞状细胞癌靶向治疗提供可能的理论依据。方法：1、应用免疫组化方法在40例舌鳞状细胞癌组织标本中检测NRP-1表达的水平，收集整理相应舌鳞状细胞癌患者术后常规病理分化等级资料，利用统计方法初步探讨舌鳞状细胞癌组织中NRP-1的阳性表达程度与临床病例分级之间的关系。2、体外实验中利用短发夹RNA（short hairpin RNA，shRNA）慢病毒表达载体构建PLKO.1/sh-NRP-1的慢病毒载体，在舌鳞状细胞癌细胞系SCC25（squamous cell carcinoma25）内抑制NRP-1的表达水平，建立稳定低表达NRP-1的SCC25细胞株，利用western blotting和实时荧光定量RT-PCR方法完成NRP-1mRNA和蛋白表达水平的鉴定。3、应用划痕实验及transwell迁移实验检测下调NRP-1对舌鳞状细胞癌细胞系SCC25迁移能力的影响，利用western blotting和实时荧光定量RT-PCR方法检测下调NRP-1对舌鳞状细胞癌细胞系SCC25上皮标记蛋白钙黏附蛋白（epithelial cadherin， E-cadherin）、间充质标记蛋白纤粘蛋白(fibronectin，FN)和波形蛋白（vimentin，VIM）表达的影响。结果：1、统计分析结果表明NRP-1表达阳性程度与临床病理等级之间有显著相关性，舌鳞状细胞癌组织中强阳性表达NRP-1的标本多对应于低分化病理等级。-32、顺利构建PLKO/sh-NRP-1质粒，测序结果表明合成的sh-NRP-1序列正确插入PLKO.1载体中。Western blotting和实时荧光定量RT-PCR结果显示，转染组NRP-1表达显著下调，抑制率达65%。3、划痕实验及transwell迁移实验结果表明NRP-1下调后舌鳞状细胞癌细胞SCC25迁移能力受到抑制。Western blotting和实时荧光定量RT-PCR结果显示：NRP-1下调后舌鳞状细胞癌细胞SCC25上皮标记蛋白E-cadherin水平较对照组上调，而间充质标记蛋白FN和VIM的水平下调，SCC25呈现出更为成熟的分化表型。结论：舌鳞状细胞癌标本中NRP-1表达阳性程度与临床病理等级之间有显著相关性，通过慢病毒载体可以成功建立稳定低表达NRP-1的舌鳞状细胞癌细胞株SCC25，NRP-1参与了调控舌鳞状细胞癌细胞分化，其机制可能与E-cadherin的上调及FN和VIM的下调有关，低表达NRP-1的舌鳞状细胞癌细胞株SCC25的迁移能力下降。NRP-1下调后的舌鳞状细胞癌SCC25细胞株呈现出更为成熟的分化表型。