激活TRPV1对骨髓来源巨噬细胞(BMM)功能的影响

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目的:以小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMM)为研究对象,观察瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)在BMM中是否表达,并探讨TRPV1对BMM功能调控的影响。  方法:体外诱导分化小鼠骨髓来源巨噬细胞,提取其总RNA和全蛋白,使用RT-PCR和Western blot实验技术以及免疫荧光检测 TRPV1在 BMM中的表达和分布;使用TRPV1的激活剂和拮抗剂,通过流式研究其对BMM吞噬和共刺激分子的影响。  结果:一、BMM表达TRPV1  体外诱导分化小鼠骨髓来源巨噬细胞,提取其总RNA和全蛋白,使用RT-PCR和Western blot实验技术证明:BMM可表达TRPV1的mRNA和蛋白质。借助免疫荧光双标法检测TRPV1在BMM中的分布,结果显示:TRPV1主要表达于BMM的细胞浆。  二、激活TRPV1可以促进BMM吞饮葡聚糖  为研究TRPV1是否参与BMM吞饮葡聚糖的过程,应用TRPV1阻断剂辣椒平和激动剂辣椒素处理BMM。结果发现:应用辣椒平预处理BMM,并不影响BMM吞饮FITC-葡聚糖的作用;而应用辣椒素预处理可明显促进BMM吞饮作用;且辣椒素的这种促BMM吞饮作用可以被辣椒平所阻断。提示:激活TRPV1可以上调BMM内吞功能。  三、激活TRPV1可以上调BMM共刺激分子的表达  为研究TRPV1是否参与BMM共刺激分子过程,应用TRPV1阻断剂辣椒平和激动剂辣椒素处理BMM。结果发现:应用辣椒平预处理BMM,并不影响BMM共刺激分子的表达;而应用辣椒素预处理则明显上调BMM共刺激分子(CD86、CD80)水平;且辣椒素的这种上调作用可以被辣椒平所阻断。提示:激活TRPV1可以上调BMM共刺激分子CD86、CD80表达水平。  结论:  1.BMM表达TRPV1;  2.激活TRPV1可以促进BMM吞饮葡聚糖;  3.激活TRPV1可以上调BMM共刺激分子CD86、CD80的表达。
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