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背景：
IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是指一组以IgA或IgA为主的免疫球蛋白及补体等复合物在。肾小球系膜区或毛细血管袢沉积的原发性肾小球疾病,在我国原发性肾小球肾炎中,发病率为30%-40%,是导致慢性肾衰竭的首位病因,而且该病临床特征和病理多样化,疾病进程不一。10年内约有10%～20%IgAN患者进入终末期肾病(end-stagerenaldisease,ESRD)。
迄今为止IgAN的发病机制还未能完全阐明,大量动物实验及临床观察都证明本病系免疫复合物介导的肾小球肾炎,有多种机制参与了其发病。根据系膜增生性肾小球肾炎的病理特点,系膜细胞与毛细血管袢内皮直接相连接无基底膜的特点,所以系膜基质与系膜细胞的损伤,增生,免疫炎症反应发生,炎症介质释放等,会直接导致毛细血管内皮细胞的缺血,缺氧,坏死。
血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)是血管内皮细胞(endothelial cells,EC)的前体细胞。生理条件下,循环系统中EPCs含量极少,局部的血管损伤、缺血、烧伤、创伤及细胞因子等均能刺激EPCs从骨髓中动员进入血液循环系统,并归巢到损伤的微血管处并分化为成熟的内皮细胞维持微血管的完整性。推测EPCs的数量及功能在IgA肾病发生发展中起决定性作用。
目的：
研究IgA肾病患者外周血内皮祖细胞(EPCs)的数量、增殖能力、集落形成能力及外周血vWF含量的变化。
方法：
1、标本来源:中国医科大学附属第一医院肾内科病房2011年6月至2011年12月住院患者中,经肾活检病理诊断为原发性IgA肾病,微小病变,膜性肾病且未经治疗患者的静脉血10ml,正常对照组来源于体检中心的健康人群。标本来源者均排除吸烟、近期外伤、手术史、皮肤溃疡、糖尿病、心血管、银屑病,类风湿,恶性肿瘤,血液系统疾病等影响EPCs的相关因素。取得患者本人知情同意。
2、流式细胞仪检测外周血EPCs的数量。密度离心法分离外周血中EPCs并进行培养,观察细胞形态及集落形成能力,并行免疫荧光鉴定内皮祖细胞。噻唑兰(MTT)法检测EPCs的增殖能力。ELISA检测外周血中人血管性血友病因子(vWF)的浓度判定内皮细胞损伤的程度。
3、实验分组
(1)正常对照组(5例):健康体检中心来源的正常人;
(2)原发性IgA肾病组(30例):经肾活检病理确认为原发性IgA肾病LeeⅠ-Ⅴ级且未经治疗患者。
(3)疾病对照组为膜性肾病(7例)组及微小病变(7例)组。
结果：
1、流式细胞检测EPCs数量:各疾病组EPCs数量减少,与正常对照组相比差异有统计学意义(p＜0.05)。
2、各疾病组之间EPCs数量的比较:微小病变组与膜性肾病组相比,差异无统计学意义,(p＞0.05),IgAN组与微小病变组及膜性肾病组相比,差异均有统计学意义,(p＜0.05)。IgANLeeⅠ-Ⅳ组与IgANLeeⅤ级相比,差异有统计学意义,(p＜0.05)。
3、外周血EPCs数量与临床生化指标的关系:检测患者临床生化指标显示胱抑素-C(r=-0.485,p＜0.05)、血尿酸(r=-0.404,p＜0.05)及血肌酐(r=-0.480,p＜0.05)与EPCs数量呈负性相关,而血IgA水平,血清白蛋白,24h尿蛋白定量,血红蛋白,尿红细胞水平等未发现与EPC水平有关,(p＞0.05)。
4、各组EPCs集落数比较:各疾病组培养的EPCs集落数显著低于正常对照组(P＜0.05);IgAN组低于轻微病变组(P＜0.05),IgAN组与膜性肾病组此相比,差异有统计学意义(p＜0.05),IgANLeeⅠ-Ⅳ级组与IgANLeeⅤ级有统计学意义(p＜.05)。
5、各组细胞增殖能力的比较:与正常对照组相比,疾病组EPCs增殖能力显著降低(p＜0.05),微小病变病组显著高于IgAN组(p＜0.01),微小病变病组与膜性。肾病组相比,差异无统计学意义(p＞0.05),IgAN组与膜性肾病组相比,差异有统计学意义(p＜0.01),IgANLeeⅠ-Ⅳ级组与IgANLeeⅤ级相比,差异有统计学差异(p＜0.01)。
6、各组vWF含量的比较:与正常对照组相比,疾病组vWF含量显著升高(p＜0.05),IgAN组显著高于微小病变病组(p＜0.01),微小病变病组与膜性肾病组相比,差异无统计学意义(p＞0.05),IgAN组与膜性肾病组相比,vWF含量显著升高,差异有统计学意义(p＜0.01),IgANLeeⅤ级组与IgANLeeⅠ-Ⅳ级相比,vWF含量显著升高差异有统计学差异(p＜0.01)。
结论：
1、IgA肾病组外周血EPCs含量减少,集落形成能力及增值能力较其他病理类型下降明显,且随着病变的加重,EPCs的数量及功能下降更明显。
2、EPCs的数量随着血肌酐,血尿酸及胱抑素-C的升高而逐渐下降。
3、IgA肾病组外周血vWF浓度较正常对照组、微小病变组及膜性肾病组明显升高,即内皮细胞的损伤比其他病理类型重。
4、EPCs将会为治疗IgA肾病提供新的思路。