禽腺病毒血清4型病毒（FAdV-4）可引起鸡发生以心包积液和肝炎为特征的疾病,称为心包积液-肝炎综合征,因其发现地为巴基斯坦安卡拉地区所以又称安卡拉病。近些年,我国不同省份都有关于此病报道,发病和死亡情况不尽相同,给养禽业造成了巨大经济损失。本研究从山西某养鸡场采集疑似感染安卡拉病的病鸡肝脏,使用特异性引物扩增出了FAdV-4的六邻体（Hexon）片段,鉴定为FAdV-4感染。取FAdV-4阳性肝脏病料处理后接种SPF鸡胚,盲传三代后收获尿囊液,获得纯种病毒。提取尿囊液DNA扩增FAdV-4的Fiber-2片段,分析其与其他FAdV-4分离株的同源性。运用杆状病毒昆虫细胞表达系统,成功表达了Fiber-2蛋白,为进一步制备禽腺病毒新型疫苗及相关研究奠定了基础。1.提取疑似患病鸡只肝脏DNA,采用特异性引物对FAdV-4 Hexon片段进行PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳后在900 bp附近出现目的条带。产物测序后,经NCBI数据库中进行序列比对,与已公布禽腺病毒Ⅰ群血清4型Hexon基因序列同源性达到99.9%,确定为FAdV-4感染。2.取确定为FAdV-4感染的病鸡肝脏,处理后接种7日龄SPF鸡胚的卵黄囊,盲传三代后鸡胚出现明显病变;取尿囊液,提取DNA进行PCR检测,产物经琼脂糖凝胶电泳后在900 bp附近出现目的条带,表明FAdV-4分离成功,命名为FAdV4-SX株。3.设计扩增FAdV-4 Fiber-2片段的特异性引物,以尿囊液DNA为模板进行PCR检测,产物经琼脂糖凝胶电泳后在1400 bp附近出现目的条带,产物测序后经NCBI数据库中与国内外禽腺病毒分离株进行比对分析。结果:FAdV4-SX株Fiber-2片段与国内近几年分离株大多相似度在100%,无变异。通过系统发育树可以看到FAdV4-SX株与国内各省分离株在同一分支,距离较近。与国外分离株如匈牙利（登录号AF036092.3）不在同一分支,距离较远。4.利用杆状病毒表达系统构建了含Fiber-2基因的重组杆状病毒穿梭载体,将其转染SF9细胞后获得重组杆状病毒,并采用悬浮放大工艺表达重组Fiber-2蛋白。可溶性分析表明重组Fiber-2蛋白主要以分泌形式进行表达,利用Ni亲和层析法分离纯化目的蛋白,纯化后的Fiber-2蛋白可以与His标签抗体产生特异性结合,说明成功表达了重组Fiber-2蛋白。