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目的多发性硬化(multiple sclerosis,MS)是以中枢神经系统(central nervous system,CNS)白质脱髓鞘病变为特点的自身免疫性疾病,患儿常因不同程度和部位的脱髓鞘病变而出现肢体瘫痪、视力障碍、共济失调、感觉障碍等症状和体征,且极易造成神经系统永久后遗症,目前人们正积极地探求其发病机制、寻找有效的治疗方法。目前认为CNS轴突再生的主要障碍之一是存在抑制再生的蛋白,现已在少突胶质细胞/髓鞘中相继发现至少三种重要的轴突再生抑制蛋白,其中髓磷脂所表达的Nogo-A蛋白可能是阻止中枢神经再生的关键因素。实验性自身免疫性脑脊髓炎(expermental autoimmune encep-halomyelitis,EAE)是人类最理想的MS动物模型,已被广泛应用于MS的基础研究中。迄今为止,在EAE方面有关Nogo-A蛋白的研究国外报道较少,国内未见报道。我们在建立急性EAE动物模型的基础上,动态观察正常大鼠、EAE大鼠CNS内的Nogo-A蛋白分布及变化情况和EAE大鼠CNS髓鞘变化,旨在探讨Nogo-A蛋白在EAE发生、发展中的作用。方法1、利用雌性Wistar大鼠建立EAE动物模型;2、采用免疫组织化学技术,检测在EAE发病后不同时点和相应对照组大鼠CNS内Nogo-A的表达情况;3、采用改良酸性品红苯胺蓝神经髓鞘染色法行髓鞘染色了解髓鞘脱失情况。结果1、免疫组化显示:(1)Nogo-A蛋白表达阳性物质呈棕黄色,位于胞浆内,在正常对照组CNS内表达广泛,但各部位表达强度不一(见表1),各时间点表达部位无变化;EAE组与对照组相比表达部位无明显变化。(2)对照组各时点CNS内Nogo-A蛋白表达量无明显差异。EAE组CNS内Nogo-A蛋白表达量的变化趋势在脑和脊髓中基本一致:在EAE发病后1d即有所下降;3d时下降至最低,明显低于对照组,差别显著;7d后Nogo-A蛋白的表达量上升;14天左右达到高峰,与对照组相比,P＜0.01;21天有所回降,28天时已明显下降,但仍高于对照组,P＜0.01;在EAE发病及恢复过程中,Nogo-A蛋白的表达变化呈先稍下降后显著升高的曲线,曲线末端仍未降至正常。2、髓鞘染色显示:(1)在正常组CNS内无髓鞘脱失,正常神经横断面染色呈车轮状,中央的轴索呈蓝色,周围的髓鞘呈红色,形状规则,呈圆形或椭圆形。(2)在EAE组不同时点CNS白质内有不同程度的髓鞘脱失、轴索脱失以及形状改变,EAE发病后1d已有明显的髓鞘脱失,有小片状脱髓鞘灶;在3d、7d髓鞘脱失最为严重,可见大片或融合的脱髓鞘灶,甚至轴索染色亦缺失,呈空泡样改变;发病后14d和21d髓鞘脱失情况见缓解,髓鞘脱失的程度与发病后1d相似;在发病后28d髓鞘脱失明显缓解,偶有单个脱髓鞘灶。结论在正常大鼠CNS内Nogo-A蛋白广泛表达,不同部位表达有量的差异;在EAE发病过程中大鼠CNS内Nogo-A分布的部位与正常大鼠相比并没有改变;在EAE发病过程中Nogo-A蛋白的表达呈早期降低,晚期回升并高于正常对照组的动态变化;而髓鞘脱失在EAE发病后的早期最为严重,到中后期开始有所恢复。提示:Nogo-A可能参与EAE的发生发展过程,尤其是在中后期对神经损伤恢复、结构重塑可能发挥重要作用。