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目的: 1.探讨张军平教授运用“络脉虚滞”理论论治心脑血管疾病的学术思想及经验。 2.研究大鼠脑缺血再灌注损伤后NLRP3及其下游炎症分子在脑组织中的表达情况,并观察中成药物丹参多酚酸对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,研究其是否通过调控NLRP3炎症小体及其下游相关炎症因子表达发挥脑保护作用。 方法: 1.通过临床跟诊学习,总结、分析张军平教授治疗心脑血管疾病临床验案,深入分析典型病例,探析“络脉虚滞”理论指导下的心脑血管疾病临床诊疗思路。 2.雄性S D大鼠,采用短暂性大脑中动脉栓塞模型(tMCAO),缺血90min后拔栓实现再灌注,模拟急性再灌注损伤患者。将造模后的大鼠随机分为模型组(tMCAO组)与丹参多酚酸治疗组(S L I组)假手术组(sham组)手术只分离右侧颈总动脉,不插入栓子。治疗组再灌注后1h采用尾源静脉注射丹参多酚酸溶液(9mg/kg),假手术组和模型组分别注射等体积生理盐水。各组大鼠取材前进行神经功能评分。各组分别于再灌注后6h,12h,24 h取材。通过神经功能评分情况判断各组神经功能缺损情况;尼氏染色,观察脑缺血再灌注后神经元生存情况;MPO免疫组化染色观察缺血再灌注后炎性浸润情况;应用Real-time PCR检测脑组织中NLRP3等基因表达情况;酶联免疫法(ELISA)检测脑组织IL-1P、IL-18等促炎因子表达情况。 结果: 1.心脑血管患者由于气血不足导致络脉失养,又脾肾亏虚,痰浊停滞,浊瘀互结,最终导致“络脉虚滞”的一种状态。张军平教授在应用“络脉虚滞”理论治疗心脑血管疾病中多应用柴胡桂枝汤、柴苓汤、升降散、四妙勇安汤等方剂加减治疗,并取得一定疗效。 2.与假手术组相比,模型组存在明显神经功能损伤,神经功能评分明显增高,应用丹参多酚酸注射液治疗后24h,神经功能有所改善。与假手术组相比,模型组和丹参多酚酸组神经元损伤明显,某些神经元的细胞核边界不清,部分神经元核仁消失;空泡样改变出现;尼氏体减少,神经元数量明显减少;与模型组相比,丹参多酚酸组神经元损伤情况有所改善。与假手术组相比,模型组与丹参多酚酸组MPO表达明显,与模型组相比,丹参多酚酸组MPO表达有所减少。与假手术组相比,脑皮质损伤区NLPR3 mRNA和蛋白表达水平均明显升高。脑组织中IL-1P和IL-18等炎症因子的表达也明显增高,并且IL-1P的表达在造模后12h达到最高,随后逐渐下降;在造模后6h、12h、24h,IL-18的表达逐渐升高。与模型组相比,丹参多酚酸组无论N L R P3的表达还是炎症因子IL-1P和IL-18的表达均有所下调。 结论: 1.“络脉虚滞”是心脑血管疾病共同的发病基础与病理表现。临床诊疗中,应用该理论作为指导可以为心脑血管疾病共同防治提供诊疗思路。 2.丹参多酚酸对于脑缺血再灌注损伤具有一定的治疗作用,且该保护作用是通过调控缺血再灌注时NLRP3炎症小体及其下游炎症因子过程实现的。