从“络脉虚滞”论治心脑血管疾病验案探析及丹参多酚酸干预脑缺血再灌注损伤早期炎症反应的机制研究

来源 :天津中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hothook
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目的:  1.探讨张军平教授运用“络脉虚滞”理论论治心脑血管疾病的学术思想及经验。  2.研究大鼠脑缺血再灌注损伤后NLRP3及其下游炎症分子在脑组织中的表达情况,并观察中成药物丹参多酚酸对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,研究其是否通过调控NLRP3炎症小体及其下游相关炎症因子表达发挥脑保护作用。  方法:  1.通过临床跟诊学习,总结、分析张军平教授治疗心脑血管疾病临床验案,深入分析典型病例,探析“络脉虚滞”理论指导下的心脑血管疾病临床诊疗思路。  2.雄性S D大鼠,采用短暂性大脑中动脉栓塞模型(tMCAO),缺血90min后拔栓实现再灌注,模拟急性再灌注损伤患者。将造模后的大鼠随机分为模型组(tMCAO组)与丹参多酚酸治疗组(S L I组)假手术组(sham组)手术只分离右侧颈总动脉,不插入栓子。治疗组再灌注后1h采用尾源静脉注射丹参多酚酸溶液(9mg/kg),假手术组和模型组分别注射等体积生理盐水。各组大鼠取材前进行神经功能评分。各组分别于再灌注后6h,12h,24 h取材。通过神经功能评分情况判断各组神经功能缺损情况;尼氏染色,观察脑缺血再灌注后神经元生存情况;MPO免疫组化染色观察缺血再灌注后炎性浸润情况;应用Real-time PCR检测脑组织中NLRP3等基因表达情况;酶联免疫法(ELISA)检测脑组织IL-1P、IL-18等促炎因子表达情况。  结果:  1.心脑血管患者由于气血不足导致络脉失养,又脾肾亏虚,痰浊停滞,浊瘀互结,最终导致“络脉虚滞”的一种状态。张军平教授在应用“络脉虚滞”理论治疗心脑血管疾病中多应用柴胡桂枝汤、柴苓汤、升降散、四妙勇安汤等方剂加减治疗,并取得一定疗效。  2.与假手术组相比,模型组存在明显神经功能损伤,神经功能评分明显增高,应用丹参多酚酸注射液治疗后24h,神经功能有所改善。与假手术组相比,模型组和丹参多酚酸组神经元损伤明显,某些神经元的细胞核边界不清,部分神经元核仁消失;空泡样改变出现;尼氏体减少,神经元数量明显减少;与模型组相比,丹参多酚酸组神经元损伤情况有所改善。与假手术组相比,模型组与丹参多酚酸组MPO表达明显,与模型组相比,丹参多酚酸组MPO表达有所减少。与假手术组相比,脑皮质损伤区NLPR3 mRNA和蛋白表达水平均明显升高。脑组织中IL-1P和IL-18等炎症因子的表达也明显增高,并且IL-1P的表达在造模后12h达到最高,随后逐渐下降;在造模后6h、12h、24h,IL-18的表达逐渐升高。与模型组相比,丹参多酚酸组无论N L R P3的表达还是炎症因子IL-1P和IL-18的表达均有所下调。  结论:  1.“络脉虚滞”是心脑血管疾病共同的发病基础与病理表现。临床诊疗中,应用该理论作为指导可以为心脑血管疾病共同防治提供诊疗思路。  2.丹参多酚酸对于脑缺血再灌注损伤具有一定的治疗作用,且该保护作用是通过调控缺血再灌注时NLRP3炎症小体及其下游炎症因子过程实现的。
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